人源核不均一核糖核蛋白E1真核表达载体在神经细胞中的表达CSCD |
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作者姓名: | 霍丽蓉 王兰英 邹俊华 钟南 |
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作者单位: | 1.首都医科大学附属复兴医院;;2.首都医科大学教育部神经变性病重点实验室;;3.北京大学医学部医学遗传系;;4.New York State Institute for Basic Research in Developmental Disabilities, Staten Island, NY 10314, USA; |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31200811);北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划"学科骨干"(2013-3-096)~~ |
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摘 要: | 背景:人源核不均一核糖核蛋白E1功能广泛,可参与神经系统骨架蛋白的表达。目的:为深入研究其在神经细胞中的作用,构建其真核表达载体,观察其在神经细胞中的表达。方法:利用真核表达载体pcDNATM4/His C,通过亚克隆构建核不均一核糖核蛋白E1-pcDNATM4/His C重组质粒,经酶切、测序鉴定,通过转染神经细胞SH-SY5Y,采用western-blot,RT-PCR鉴定核不均一核糖核蛋白E1重组质粒的表达,并观察转染细胞的生长现象。结果与结论:成功构建了核不均一核糖核蛋白E1的真核表达载体,mRNA和蛋白水平上均证实了该质粒可在神经细胞SH-SY5Y中正确表达。SH-SY5Y细胞在转染核不均一核糖核蛋白E1后表现为加速生长。提示该蛋白对神经细胞的生长发育具有重要的作用。该载体为进一步研究核不均一核糖核蛋白E1在神经系统中的功能提供了前提条件。
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关 键 词: | 组织构建 组织工程 核不均一核糖核蛋白E1 表达载体 神经细胞 国家自然科学基金 |
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