芍甘木瓜汤通过BDNF/TrkB/CREB信号通路改善脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学研究

目的 观察芍甘木瓜汤对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学的影响，并探讨对脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸蛋白激酶B（TrkB）/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）信号通路的调控机制。方法 取50只SD大鼠采用改良线栓法制作大脑中动脉梗死模型，选取建模成功大鼠随机分为模型组、巴氯芬（0.008 g/kg）组和芍甘木瓜汤低、中、高剂量（0.05、0.10、0.15 g/kg）组。另取10只SD大鼠不栓塞大脑中动脉作为假手术组，于再灌注2 h后ig给药，每天1次，连续2周，假手术组和模型组ig等量生理盐水。干预前后分别采用Zea Longa量表、改良Ashworth量表评价神经行为学、肌张力变化，采用大鼠多导生理记录仪测定上肢伸直幅度；酶联免疫法检测大鼠干预前后血清BDNF、TrkB水平；苏木素-伊红（HE）染色观察缺血半暗带脑组织病理变化，透射电镜下观察缺血半暗带脑组织神经元超微结构；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测缺血半暗带脑组织BDNF、TrkB-FL、TrkB-T1、CREB mRNA表达；Western blotting检测BDNF、TrkB-FL、TrkB-T1、CREB蛋白表达及p-CREB水平。结果 干预后巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组的Zea Longa量表、改良Ashworth量表分级均较干预前和模型组（干预后）显著改善（P<0.05），上肢伸直幅度均较干预前和模型组（干预后）均显著增加（P<0.05），血清BDNF、TrkB水平均较干预前和模型组（干预后）显著升高（P<0.05），缺血半暗带脑组织病理变化和神经元超微结构均较模型组明显改善。模型组缺血半暗带脑组织BDNF、TrkB-FL mRNA与蛋白表达，p-CREB蛋白水平均显著低于假手术组（P<0.05），巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组均较模型组显著升高（P<0.05）；模型组缺血半暗带脑组织TrkB-T1 mRNA与蛋白表达显著高于假手术组（P<0.05），巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组均较模型组显著下降（P<0.05）。各组缺血半暗带脑组织CREB mRNA表达差异无统计学意义。结论 对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠ig予以芍甘木瓜汤可改善其神经行为学，降低肌张力，增加血清BDNF、TrkB水平，减轻缺血半暗带脑组织病理和神经元超微结构变化，推测与激活BDNF/TrkB/CREB通路，上调BDNF、TrkB-FL mRNA与蛋白表达，下调TrkB-T1 mRNA与蛋白表达，增加p-CREB水平有关。

Effect of Shaogan Mugua Decoction on neuroethology and regulation mechanism of BDNF/TrkB/CREB pathway in rats with spastic hemiplegia after stroke