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槐耳蛋白聚糖TPG-1抑制人肝癌SK-HEP-1细胞生长的机制
引用本文:杨爱琳,黄惠铭,刘亚鑫,欧阳里山,范海涛,屠鹏飞,胡仲冬.槐耳蛋白聚糖TPG-1抑制人肝癌SK-HEP-1细胞生长的机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(1):72-78.
作者姓名:杨爱琳  黄惠铭  刘亚鑫  欧阳里山  范海涛  屠鹏飞  胡仲冬
作者单位:北京中医药大学中药学院中药现代研究中心;北京电子科技职业学院生物工程学院
基金项目:北京市科技新星计划项目(Z191100001119083);中华中医药学会青年人才托举工程项目[CACM-2018-(QNRC2-B05)]。
摘    要:目的:蛋白聚糖TPG-1具有良好的抗肝癌活性,本研究进一步探究蛋白聚糖TPG-1抗肝癌的分子作用机制。方法:用槐耳蛋白聚糖TPG-1(0,0.05,0.1,0.25,0.5,1 g·L-1)处理人肝癌SK-HEP-1细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测槐耳蛋白聚糖TPG-1对SK-HEP-1细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测TPG-1对SK-HEP-1细胞凋亡的影响。对经TPG-1处理过的人肝癌SK-HEP-1细胞进行基因芯片检测分析,探讨TPG-1抗肝癌的分子作用机制。结果:与空白组比较,槐耳蛋白聚糖TPG-1能够显著抑制人肝癌SK-HEP-1细胞的增殖能力(P<0.01)。TPG-1(1 g·L-1)作用于SK-HEP-1细胞48 h,SK-HEP-1细胞凋亡率显著增加(P<0.01),且TPG-1给药能够显著促进细胞凋亡重要执行者含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3和Caspase-7的剪切水平(P<0.01)。与空白组比较,TPG-1(0.1 g·L-1)能够抑制SK-HEP-1细胞的迁移能力(P<0.05)。基因芯片检测分析结果显示,TPG-1处理后,SK-HEP-1细胞中差异表达基因有971个,其中表达上调基因486个,表达下调基因485个。基因本体(GO)和通路(Pathway)分析结果显示表达差异基因的功能主要涉及白细胞介素-6(IL-6)生物合成、抗原加工与呈递、超氧化物歧化酶活性、丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶(MAPKKK)级联反应的正调控、自然杀伤(NK)细胞趋化、趋化因子生物合成等。此外,表达差异基因所涉及的信号通路主要包括核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体信号通路,凋亡,Toll样受体信号通路,维甲酸诱导基因-Ⅰ(RIG-Ⅰ)样受体信号通路,T细胞受体信号通路及趋化因子信号通路等。蛋白免疫印迹法结果显示,TPG-1(1 g·L-1)能够显著激活SK-HEP-1细胞中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路(P<0.01)。结论:槐耳蛋白聚糖TPG-1能够抑制人肝癌SK-HEP-1细胞增殖及迁移能力并促进其发生凋亡,MAPK信号通路的激活可能与TPG-1发挥抑制人肝癌SK-HEP-1细胞生长作用有关。

关 键 词:槐耳  蛋白聚糖TPG-1  人肝癌SK-HEP-1细胞  基因芯片  丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路
收稿时间:2021/9/15 0:00:00

Mechanism of Proteoglycan TPG-1 from Trametes robiniophila Inhibiting Growth of Human Hepatoma SK-HEP-1 Cells
YANG Ai-lin,HUANG Hui-ming,LIU Ya-xin,OUYANG Li-shan,FAN Hai-tao,TU Peng-fei,HU Zhong-dong.Mechanism of Proteoglycan TPG-1 from Trametes robiniophila Inhibiting Growth of Human Hepatoma SK-HEP-1 Cells[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(1):72-78.
Authors:YANG Ai-lin  HUANG Hui-ming  LIU Ya-xin  OUYANG Li-shan  FAN Hai-tao  TU Peng-fei  HU Zhong-dong
Institution:(Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine,School of Chinese Materia Medica,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100029,China;College of Bioengineering,Beijing Polytechnic,Beijing\00029,China)
Abstract:
Keywords:Trametes robiniophila  proteoglycan TPG-1  human hepatoma SK-HEP-1 cells  gene chip  mitogen-activated protein kinase(MAPK)signaling pathway
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