| 强力霉素调控的真核表达体系ALC-pTet-on Advanced成釉细胞株的建立 |
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| 引用本文： | 李东亮,梁广智,何永云,刘晓影,孙岩,张娟娟,李武修,高玉光.强力霉素调控的真核表达体系ALC-pTet-on Advanced成釉细胞株的建立[J].牙体牙髓牙周病学杂志,2010(1). |
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| 作者姓名： | 李东亮 梁广智 何永云 刘晓影 孙岩 张娟娟 李武修 高玉光 |
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| 作者单位： | 潍坊医学院口腔医学院;山东科技大学; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目资助(30672316); 山东省教育厅重点项目(J06L22) |
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| 摘 要： | 目的:建立可受强力霉素调控的高表达外源基因的真核表达体系ALC-pTet-on Advanced细胞株,用于基因功能的研究。方法:将质粒pTet-on Advanced转染至成釉细胞系(ALC),用1 000μg/mL的G418筛选抗性克隆。用RT-PCR进行DNA的整合鉴定,并瞬时转染荧光素报告基因(pTRE-Tight-Luc)对pTet-on Advanced阳性克隆株的功能进行鉴定。结果:G418压力筛选后,获得了13个细胞克隆株,RT-PCR检测均表达反义四环素转录激活子(rtTA Advanced),PCR产物测序结果与pTet-on Advanced基因序列一致,表明pTet-on Advanced基因片段已整合进小鼠成釉细胞基因组DNA,荧光素报告基因功能鉴定获得l株诱导表达倍率为22.1的克隆株,且pTet-on Advanced基因阳性的成釉细胞株的形态和生长度与正常成釉细胞没有明显差异。结论:通过脂质体转染的方法成功地获得l株诱导表达倍率为22.1的高表达成釉细胞株,为进一步研究EMPs在成釉细胞中功能打下了基础。
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| 关 键 词： | 转染 诱导表达 tet-on Advanced系统 成釉细胞系 |
Establishment of ameloblast cell strain controlled by the pTet-on regulatory systerm |
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| LI Dong-liang,LIANG Guang-zhi,HE Yong-yun,LIU Xiao-ying,SUN Yan,ZHANG Juan-juan,LI Wu-xiu,GAO Yu-guang.Establishment of ameloblast cell strain controlled by the pTet-on regulatory systerm[J].Chinese Journal of Conservative Dentistry,2010(1). |
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| Authors: | LI Dong-liang LIANG Guang-zhi HE Yong-yun LIU Xiao-ying SUN Yan ZHANG Juan-juan LI Wu-xiu GAO Yu-guang |
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| Institution: | LI Dong-liang,LIANG Guang-zhi,HE Yong-yun,LIU Xiao-ying,SUN Yan,ZHANG Juan-juan,LI Wu-xiu,GAO Yu-guang(Institution of Stomatology,Weifang Medical College,Weifang 261042,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | transfection inducible expression tet-on advanced systerm ameloblast-linege cell |
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