pEGFP-C1-PTEN的构建及其在乳腺癌细胞ZR-75-1中的表达 |
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引用本文: | 武鸿斌,宋燕,谢忠士,刘志毅,姜洋,柳福海,赵航.pEGFP-C1-PTEN的构建及其在乳腺癌细胞ZR-75-1中的表达[J].山东医药,2008,48(12):45-46. |
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作者姓名: | 武鸿斌 宋燕 谢忠士 刘志毅 姜洋 柳福海 赵航 |
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作者单位: | 吉林大学中日联谊医院,吉林长春,130033 |
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摘 要: | 采用分子克隆技术构建重组质粒人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-PTEN),以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株ZR-75-1中,应用RT-PCR、Western印迹法分析目的 基因的表达.双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1.2 kb,测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同;RT-PCR、Western印迹显示pEGFP-C1-PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达.成功构建了人野生型PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1-PTEN,并将其成功转染入乳腺癌细胞ZR-75-1中,为研究PTEN在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.
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关 键 词: | 第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因 真核表达载体 绿色荧光蛋白 基因转染 乳腺癌细胞 作用 肿瘤发生发展 研究 蛋白表达 PTENmRNA 显示 完全 基因序列 Gene Bank 编码基因 测序法 基因片段 克隆 结果 双酶切 分析 印迹法 Western |
文章编号: | 1002-266X(2008)12-0045-02 |
修稿时间: | 2008年1月29日 |
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