去甲肾上腺素和血管紧张素Ⅱ对乳鼠心肌细胞表达肿瘤坏死因子α的影响

目的 观察去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对培养乳鼠心肌细胞表达TNF-α的影响.方法 取1～3天SD乳鼠100只进行心肌原代培养,分为7组,对照组、105mol/L NE组(A组)、10-6mol/L NE组(B 组)、10-7mol/L NE组(C组)、10-7mol/L AngⅡ组(D组)、10-8mol/L Ang Ⅱ组(E组)和10-9mol/L Ang Ⅱ组(F组).采用免疫组织化学法和RT-PCR测定上述不同浓度培养心肌细胞24、48 h,评价不同浓度NE、AngⅡ对心肌细胞表达TNF-α的影响.用凝胶滞留实验验证NF kB是否参与TNF-α的转录调控,筛选TNF-α可能启动子的位 点.结果 对照组心肌细胞TNF-α呈阴性,B、C、E、F组呈弱阳性,A组和D组呈阳性.对照组心肌细胞表达微量的TNF-α mRNA,NE和Ang Ⅱ各组表达显著增高,并存在浓度和时间梯度.NE和AngⅡ各组的核蛋白与其上游含有潜在NF-kB结合位点的两段寡核苷酸的结合强于对照组.结论 NE和Ang Ⅱ能促使培养的心肌细胞表达TNF-α,NF-kR的核转移是激活TNF-α表达的共同通路.

Effects of norepinephrine and angiotensin Ⅱ on expression of TNF-α in cultured cardiomyocytes of neonatal rats