雌激素受体/一氧化氮/环磷酸鸟苷通路介导雌马酚逆转环孢素抑制骨髓间充质干细胞

背景：长期服用环孢素可抑制成骨细胞分化，导致骨质疏松，而植物雌激素雌马酚可促进成骨细胞增殖与分化。 目的：探讨雌马酚对环孢素处理的小鼠骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞分化的影响，分析其可能存在的信号通路。 方法：贴壁法分离培养小鼠骨髓间充质干细胞，分为5组，分别给予雌马酚、环孢素、雌马酚+环孢素、雌马酚+环孢素+ICI182780、雌马酚+环孢素+L-NAME。倒置显微镜下观察骨髓间充质干细胞的形态学变化及矿化能力，通过检测3H]-甲基胸腺嘧啶掺入率反映细胞增殖情况，通过测定细胞内碱性磷酸酶活性与钙沉积量反映细胞向成骨细胞分化能力，测定培养液中一氧化氮产量与细胞内环磷酸鸟苷含量。 结果与结论：合用雌马酚与环孢素可完全逆转单用环孢素引起3H]-甲基胸腺嘧啶掺入率、细胞内碱性磷酸酶活性、钙沉积量的减少(P < 0.05或0.01)，并伴随一氧化氮产量与细胞内环磷酸鸟苷含量的恢复(P < 0.01)，同时倒置显微镜下可观察到干预12 d时较高的细胞生长密度和矿化结节形成，以上作用可被雌激素受体拮抗剂ICI182780、一氧化氮合酶抑制剂L-NAME取消。提示雌马酚可通过雌激素受体/一氧化氮/环磷酸鸟苷信号通路逆转环孢素抑制骨髓间充质干细胞的增殖及向成骨细胞的分化。