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| 精子载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在转基因小鼠体内的表达 | |
| 引用本文： | 尹俊,王鸿利,王学锋,璩斌,储海燕,李稻,陈红兵,康文英,段宝华,戚正武,王振义. 精子载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在转基因小鼠体内的表达[J]. 中国实验血液学杂志, 2002, 10(4): 332-336 |
| 作者姓名： | 尹俊 王鸿利 王学锋 璩斌 储海燕 李稻 陈红兵 康文英 段宝华 戚正武 王振义 |
| 作者单位： | 1. 上海第二医科大学附属瑞金医院,上海血液学研究所,上海,200025 2. 上海市医学检验重点实验室,上海,200023 3. 中国科学院生物化学研究所,上海,200031 |
| 摘 要： | 利用精子载体技术通过人工授精观察人凝血因子Ⅷ基因在转基因小鼠体内的表达，将含有人FⅧBD（B-domain deleted)cDNA的质粒pRC/RSV-hFⅧBDl转染至小鼠精子，通过人工授精使母鼠受孕，新生小鼠出生后第4周，应用PCR筛查hFⅧBDcDNA阳性转基因幼鼠，取转有人FⅧBDcDNA幼鼠的血液检测血浆中的人FⅧ抗原和抗体，分别用Northern印迹和Western印迹检测脾，肝，肺和肾组织中人FⅧBDcDNA的转录和表达。结果发现，人工授精后20只受体母鼠7只受孕，共产下11只仔鼠，存活9只，PCR筛检出3只转有人FⅧBDcDNA的阳性鼠，3只阳性鼠血浆中的人FⅧ抗原量分别为8.65ng/ml,7.84ng/ml和8.44ng/ml，人FⅧ的抗体均为阴性。Northern印迹和Western印迹检测显示3只F1代阳性幼鼠的脾，肝，肺和肾组织中均有人FⅧBDcDNA的转录和表达。结论提示，利用精子载体法可以制备转有人凝血因子Ⅷ基因的转基因小鼠，并表达人FⅧ蛋白，这为用精子载体技术生产转基因动物并将之作为生物反应器生产人凝血因子Ⅷ提供了实验依据。 |
| 关 键 词： | 转基因动物 凝血因子Ⅷ 基因表达 精子载体技术 人工授精 血友病 |
| 修稿时间： | 2001-12-04 |
Sperm-Mediated Expression of Human Clotting Factor Ⅷ gene in Transgenic Offspring of Mice |
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| YIN Jun,WANG Hong-Li,Wang Xue-Feng,QU Bin,CHU Hai-Yan,LI Dao,CHEN Hong-Bing,KANG Wen-Ying,DUAN Bao-Hua,QI Zheng-Wu,WANG Zhen-Yi. Sperm-Mediated Expression of Human Clotting Factor Ⅷ gene in Transgenic Offspring of Mice[J]. Journal of experimental hematology, 2002, 10(4): 332-336 | |
| Authors: | YIN Jun WANG Hong-Li Wang Xue-Feng QU Bin CHU Hai-Yan LI Dao CHEN Hong-Bing KANG Wen-Ying DUAN Bao-Hua QI Zheng-Wu WANG Zhen-Yi |
| Affiliation: | Shanghai Institute of Hematology, Ruijin Hospital Affiliated to Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025, China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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