阳离子脂质体介导NF-κB“decoy”ODNS转染巨噬细胞条件的优化

目的：观察NF-κB“decoy”ODNS在阳离子脂质体lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞J774．1的优化参数以及在细胞内的分布。方法：改变ODN与lipofectin比率、转染时间;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率;荧光显微镜观察细胞内荧光分布;测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)观察细胞损伤情况。结果：Lipofectin介导转染显著提高J774．1细胞对NF—κB“decoy”0DNS的摄取;在24孔培养板中,NF—κB“decoy”ODNS与lipofectin比率(W／W)为1：5、转染6h时,转染效率最佳而细胞毒性相对较低;lipofectin介导转染6h后,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质。结论：Lipofectin可增加NF—κB“decoy”ODKS的细胞摄入并改变其细胞内分布;NF—κB“decoy”0DNS与lipofectin比率(W／W)为1：5、转染6h时可获得最佳转染效率。