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MIF基因沉默对肝癌细胞系增殖凋亡及ERK/RSK2信号通路的影响
引用本文:周鸣,余蕾,李琴山,王碧,杨国珍.MIF基因沉默对肝癌细胞系增殖凋亡及ERK/RSK2信号通路的影响[J].中国现代医学杂志,2017,27(19):22-27.
作者姓名:周鸣  余蕾  李琴山  王碧  杨国珍
作者单位:1.贵州医科大学医学检验学院,贵州贵阳550025;2.贵州医科大学附属医院 贵州省产前诊断中心,贵州贵阳550002
摘    要:目的探讨RNA 干扰介导的巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因沉默对肝癌细胞系SMMC-7721与HepG2 凋亡的影响及可能的作用机制。方法将MIF-siRNA 干扰序列转染SMMC-7721 与HepG2 细胞,以Con-siRNA序列转染的细胞作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blot检测MIF沉默效果,CCK-8 法测定细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。采用Western blot检测MIF 沉默后凋亡相关基因BCL-2、BAX、P53 的蛋白水平及细胞外信号调节激酶(ERK)、P90 核糖体s6 激酶2(RSK2)、糖原合成激酶3β(GSK3β)、Bad 蛋白水平及其磷酸化水平。结果沉默组细胞中MIF mRNA 及蛋白表达水平与对照组比较,差异有统计学意义(p <0.05),沉默组低于对照组;两组细胞增殖能力比较,差异有统计学意义(p < 0.05),MIF沉默组细胞增殖能力低于对照组;两组凋亡率比较,差异有统计学意义(p <0.05),MIF沉默组细胞凋亡率高于对照组;两组细胞BAX、P53、BCL-2 蛋白水平比较,差异有统计学意义(p <0.05),MIF 沉默组细胞BAX、P53 的蛋白表达水平高于对照组,而BCL-2 蛋白水平低于对照组;沉默组与对照组细胞中ERK、RSK2 及Bad 蛋白水平比较,差异均无统计学意义(p >0.05),而沉默组与对照组细胞中GSK3β、p-GSK3β、p-ERK、p-RSK2 及p-Bad 蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(p <0.05)。结论MIF 基因沉默抑制SMMC-7721与HepG2细胞的增殖能力并促进细胞凋亡可能是通过调节ERK/RSK2信号通路实现的。

关 键 词:巨噬细胞移动抑制因子  基因沉默  肝癌细胞系  凋亡  细胞外信号调节激酶
收稿时间:2017/1/16 0:00:00

Effect of silencing MIF gene by RNAi on proliferation, apoptosis and ERK/RSK2 signal pathway in hepatic carcinoma cell line
Ming Zhou,Lei Yu,Qin-shan Li,Bi Wang,Guo-zhen Yang.Effect of silencing MIF gene by RNAi on proliferation, apoptosis and ERK/RSK2 signal pathway in hepatic carcinoma cell line[J].China Journal of Modern Medicine,2017,27(19):22-27.
Authors:Ming Zhou  Lei Yu  Qin-shan Li  Bi Wang  Guo-zhen Yang
Institution:1. School of Medical Laboratory Sciences, Guizhou Medical University, Guiyang, Guizhou 550025, China; 2. Guizhou Provincial Prenatal Diagnosis Center, the Affiliated Hospital of Guizhou Medical University, Guiyang, Guizhou 550002, China
Abstract:
Keywords:MIF  gene silencing  hepatic carcinoma cell line  apoptosis  ERK
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