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降钙素基因相关肽对脂多糖诱导血管平滑肌细胞TLR4/NK-资B及炎症因子表达的影响
引用本文:王芳,周祥群,付洁.降钙素基因相关肽对脂多糖诱导血管平滑肌细胞TLR4/NK-资B及炎症因子表达的影响[J].中国现代医学杂志,2017,27(21):12-17.
作者姓名:王芳  周祥群  付洁
作者单位:1.海南省第三人民医院心血管内科,海南三亚572000;2.新乡医学院 组织胚胎学教研室,河南新乡453003
基金项目:海南省卫生厅课题(No:1421320.24A1004)
摘    要:目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对脂多糖(LPS)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)TLR4/NK-kB 及炎症因子表达的影响。方法贴壁法培养VSMCs,根据不同的处理方案,分为对照组、LPS 处理组、CGRP组、(LPS+CGRP)组及(LPS+CGRP+C8-37)组;ELISA 检测不同组VSMCs 中白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α )和基因表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测不同组VSMCs 中Toll 样受体4(TLR4)、I资Ba及p65蛋白表达水平。结果①LPS处理VSMCs后,随着LPS浓度的升高,IL-1β和TNF-α表达水平成梯度增加,并于1 000 ng/ml 时分泌水平最高(p <0.05),在8 h时达到峰值( p<0.05);②CGRP 剂量依赖性降低LPS 诱导IL-1β和TNF-α的表达(p <0.05),并于100 nmol/L 时达到低峰点(p <0.05);③CGRP能抑制LPS 诱导的细胞TLR4 蛋白的积累(p <0.05),抑制IkBa 与p65 蛋白的磷酸化水平(p <0.05);④CGRP阻断剂C8-37可以逆转CGRP对LPS刺激的VSMCs中IL-1β和TNF-α表达(p <0.05),拮抗CGRP对TLR4和NK-kB 的抑制(p <0.05)。结论CGRP 通过抑制TLR4 蛋白的积累,阻断NF-κB 信号蛋白IkBa 与p65的磷酸化,进而削弱LPS 诱导的细胞炎症因子IL-1β和TNF-α的激活,抑制LPS 诱导的VSMCs 炎症的激活。

关 键 词:降钙素基因相关肽  血管平滑肌细胞  Toll样受体4  NF-κB
收稿时间:2017/2/28 0:00:00

Effect of CGRP on lipopolysaccharide-induced expressions of TLR4/NK-kB and inflammatory factors of vascular smooth muscle cells
Fang Wang,Xiang-qun Zhou,Jie Fu.Effect of CGRP on lipopolysaccharide-induced expressions of TLR4/NK-kB and inflammatory factors of vascular smooth muscle cells[J].China Journal of Modern Medicine,2017,27(21):12-17.
Authors:Fang Wang  Xiang-qun Zhou  Jie Fu
Institution:1. Department of Cardiology, the Third People''s Hospital of Hainan Province, Sanya, Hainan 572000, China; 2. Department of Histology and Embryology, Xinxiang Medical College, Xinxiang, Henan 453003, China
Abstract:
Keywords:calcitonin gene-related peptide  vascular smooth muscle cell  Toll-like receptor 4  NK-kB
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