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小鼠β2m基因打靶载体的构建及序列分析
引用本文:孟瑛,黄绍良,余新炳,徐劲,吴忠道,李树浓.小鼠β2m基因打靶载体的构建及序列分析[J].热带医学杂志,2002,2(2):108-113.
作者姓名:孟瑛  黄绍良  余新炳  徐劲  吴忠道  李树浓
作者单位:1. 中山大学中山医学院病理生理学教研室,广州,510089
2. 中山大学第二附属医院儿科,广州,510120
3. 中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510089
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (No.3980 0 1 34),广东省青年科学基金 (No.980 687),中山医科大学“2 1 1工程”重点课题 (No .2 0 1 1 0 2 - 1 1 0 5)
摘    要:目的 采用分子生物学技术,构建小鼠β2m基因打靶载体,为进一步进行胚胎干细胞基因敲除、建立β2m基因缺陷型干细胞奠定基础。方法 通过设计和合成引物,经PCR从小鼠β2m-pSV2ΔHXgpt基因组克隆分别扩增小鼠β2m的4.2kb和0.8kb片段作为同源臂,将其分别插入载体pPNT的neo基因两侧,构建小鼠β2m基因替换型打靶载体pPNT-β2m。结果 经过PCR、限制性酶酶切鉴定,以及DNA序列分析,证实此两条同源臂为包含小鼠β2m前三个外显子在内的基因片段,证明载体构建成功。结论 PCR法构建基因打靶载体是新颖、简便而可靠的方法。

关 键 词:β2m基因打靶载体  β2微球蛋白  基因打靶  分子生物学  胚胎干细胞  主要组织相容性复合体  组织工程  聚合酶链反应
文章编号:0254-900X(2002)02-0108-06
修稿时间:2002年4月27日

Construction and Sequence Analysis of the Mouse β2m Gene Targeting Vector
Meng Ying ,Huang Shaoliang ,Yu Xinbing ,Xu Jin ,Wu Zhongdao ,Li Shunong.Construction and Sequence Analysis of the Mouse β2m Gene Targeting Vector[J].Journal Of Tropical Medicine,2002,2(2):108-113.
Authors:Meng Ying  Huang Shaoliang  Yu Xinbing  Xu Jin  Wu Zhongdao  Li Shunong
Institution:Meng Ying 1,Huang Shaoliang 2,Yu Xinbing 3,Xu Jin 3,Wu Zhongdao 3,Li Shunong 1 1.Department of Pathophysiology,Sun Yat sen Medical College,Sun Yat sen University,Guangzhou 510089 2.Department of Pediatrics,The Second Affiliated Hospital
Abstract:
Keywords:MHC  PCR
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