miRNA-126对肺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭及EGFR/AKT/mTOR信号通路的影响 |
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作者姓名: | 唐夏莉 焦德敏 陈君 王剑 陈清勇 |
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作者单位: | 1.中国人民解放军第一一七医院呼吸内科,浙江,杭州,310004 |
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基金项目: | 浙江省公益性技术应用研究计划(No.2013C33209;No.2014C33277);杭州市医疗卫生科研项目(No.20130633B29;No.20140633B40) |
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摘 要: | 目的:探讨微小RNA(microRNA,miRNA)-126对肺癌A549细胞功能的影响及相关的作用机制。方法:利用脂质体试剂Lipofectamine2000将miRNA-126转染入肺癌A549细胞中,采用real-timePCR法检测转染后各组细胞中miRNA-126的表达;MTT法检测细胞活力;台盼蓝拒染实验检测细胞存活数目;细胞集落培养实验观察转染后细胞集落形成;划痕愈合实验检测细胞的迁移能力;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;Westernblot法检测EGFR/AKT/mTOR通路中各蛋白水平的变化。结果:Real-timePCR结果显示,转染miRNA-126组细胞中的miRNA-126表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01),而阴性对照组与空白对照组无显著变化;A549细胞转染miRNA-126模拟物后,细胞增殖和集落形成能力均呈明显下降(P<0.01);肺癌细胞的迁移和侵袭能力也受到明显抑制(P<0.01);Westernblot结果显示,转染miRNA-126组细胞中EGFR/AKT/mTOR通路相关蛋白p-EGFR、p-AKT和p-mTOR的水平均有明显降低(P<0.01)。结论:miRNA-126可以显著降低肺癌A549细胞中p-EGFR、p-AKT和p-mTOR的蛋白水平,进而可能抑制其细胞增殖和迁移侵袭能力。
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关 键 词: | 微小RNA-126 EGFR/AKT/mTOR通路 肺癌 细胞增殖 |
收稿时间: | 2015-09-22 |
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