全反式维甲酸联合Ⅳ型胶原促进胚胎干细胞向平滑肌细胞分化 |
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作者姓名: | 邵晓平 彭程飞 田孝祥 闫承慧 韩雅玲 张红明 刘大男 |
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作者单位: | 贵州医科大学附属医院心内科,贵州省贵阳市 550000,沈阳军区总医院心内科,辽宁省沈阳市 110016,沈阳军区总医院心内科,辽宁省沈阳市 110016,沈阳军区总医院心内科,辽宁省沈阳市 110016,沈阳军区总医院心内科,辽宁省沈阳市 110016,济南军区总医院心内科,山东省济南市 250000,贵州医科大学附属医院心内科,贵州省贵阳市 550000 |
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基金项目: | 贵州省高层次创新型人才培养计划项目(黔科合人才2015 4026);贵州省社会发展攻关项目(黔科合SY 20133017);贵州省优秀青年科技人才培养对象专项资金项目(黔科合人字201126);贵州省对外合作项目(黔科合省20117001) |
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摘 要: | 目的探讨全反式维甲酸(atRA)联合Ⅳ型胶原(collagenⅣ)能否更好的促进小鼠胚胎干细胞(m ESC)向平滑肌细胞分化。方法体外培养m ESC,通过碱性磷酸酶染色、SSEA1染色和在体成瘤实验检测m ESC全能性。制作胚胎小体(EB)并悬浮3天后分别分为:无诱导(对照组)、atRA诱导组、Ⅳ型胶原诱导组、atRA联合Ⅳ型胶原诱导组,使其贴壁分化。通过平滑肌细胞抗体(SM-αactin)的Western blot检测及SM-αactin与平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)免疫荧光双染结果观察比较不同组别的细胞分化为平滑肌细胞的情况并进行比较。结果经m ESC全能性鉴定,提示小鼠胚胎干细胞的培养成功。发现在第7天及第14天atRA联合Ⅳ型胶原诱导组细胞SM-αactin蛋白表达量均明显高于其他3组,同时观察第14天的SM-αactin与SM-MHC双荧光染色,发现atRA联合Ⅳ型胶原诱导组的SM-αactin与SM-MHC表达量也是最高,表明细胞的分化成熟度是最好的,atRA诱导组和Ⅳ型胶原诱导组次之,对照组最差。结论全反式维甲酸联合Ⅳ型胶原能够更好的促进胚胎干细胞向平滑肌细胞分化。
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关 键 词: | 胚胎干细胞 全反式维甲酸 Ⅳ型胶原 SM-α actin SM-MHC |
收稿时间: | 2015-06-04 |
修稿时间: | 2015-09-15 |
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