| 以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体 |
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| 引用本文： | 汪宗桂,郑文岭,马文丽,梁念慈.以ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体[J].中国临床康复,2006,10(20):110-112. |
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| 作者姓名： | 汪宗桂 郑文岭 马文丽 梁念慈 |
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| 作者单位： | [1]广东医学院生物化学教研室,广东省湛江市524023 [2]华南基因组研究中心,广东省广州市510800 [3]南方医科大学基因工程研究所,广东省广州市510515 |
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| 摘 要： | 目的：构建ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体，以克服原核生物表达系统生产人生长激素存在的缺陷。
方法：实验于2002．08在解放军广州军区广州总医院医学实验科进行。①先把人生长激素基因片段克隆到ECHO系统的供载体中，构建供载体pUni／Lox-HGH。②让该供载体与具Lox位点的受载体在Cre重组酶的作用下融合，构建出人生长激素的哺乳动物表达载体pcDNA4．1／pUni-HGH，使人生长激素基因处于CMV启动子的调控下，EcoRl单酶切及BarnHI／EcoRI双酶切鉴定重组质粒。
结果：由琼脂糖凝胶电泳和序列测定证实，用ECHO克隆系统构建的融合质粒中，确实含有人生长激素带内含子的基因序列。
结论：用ECHO克隆系统可以构建人生长激素的哺乳动物表达载体，且方便、快捷，为取代原核生物表达系统生产人生长激素，提供了依据。
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| 关 键 词： | 人生长激素 遗传载体 电泳 琼脂凝胶 |
| 收稿时间： | 07 5 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 03 25 2006 12:00AM |
Cloning human growth hormone gene into the mammalian expression vector with ECHO system |
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| Wang Zong-gui, Zheng Wen-ling, Ma Wen-li, Liang Nian-ci.Cloning human growth hormone gene into the mammalian expression vector with ECHO system[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2006,10(20):110-112. |
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| Authors: | Wang Zong-gui Zheng Wen-ling Ma Wen-li Liang Nian-ci |
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| Institution: | 1.Department of Biochemistry, Guangdong Medical College, Zhanjiang 524023, Guangdong Province, China; 2.Research Center of Genome of South China, Guangzhou 510800, GuangdongProvince, China; 3.Institute of Genetic Engineering, South Medical University, Guangzhou 510515, Guangdong Province, China |
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