百日咳毒素单克隆抗体的研制及在诊断中的应用

百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)是百日咳杆菌的主要致病因子。最近证明:PT含有5种亚单位(S_1,S_2,S_3,S_4和S_5,比例为1:1:1:2:1),具有外毒素特性,分子量为99000u。国内这方面的研究较少,作者研制成功PT单克隆抗体(McAb),用纯化的PT抗原(美国Sclaco公司)免疫BALB/c-J小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NSo)融合。10d后先以ELISA筛选抗PT阳性克隆,再用中国仓鼠卵细胞(CHO)进行抗PT中和试验。经过反复克隆,获得一株持续稳定分泌小鼠IgG_1(κ)型McAb的抗PT杂交瘤细胞株(4B_9G_(12))。蛋白质转印试验(Western Blot)证明,4B_9G_(12)仅与PT分子中的S_3亚单位反