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| Nucleophosmin基因表达载体的构建及其在HepG2中的表达 | |
| 引用本文： | 李辉宇,罗飞,赵浩亮,贺杰峰,肖红.Nucleophosmin基因表达载体的构建及其在HepG2中的表达[J].中国药物与临床,2010,10(8):868-870. |
| 作者姓名： | 李辉宇 罗飞 赵浩亮 贺杰峰 肖红 |
| 作者单位： | 1. 山西医科大学第一医院普外科,太原,030001 2. 山西省肿瘤医院乳腺外科 3. 山西医科大学第一医院病理科,太原,030001 |
| 基金项目： | 山西省卫生厅科技攻关项目，太原市大学生创业创新专项 |
| 摘 要： | 目的克隆Nucleophosmin(NPM)的编码序列,构建含Nucleophosmin基因的真核细胞表达载体并在肝癌细胞系HepG2中表达,为进一步研究该基因在肝癌多药耐药中的作用奠定基础。方法根据已发表的Nucleophosmin基因的核苷酸序列设计合成一对引物,以人乳腺癌组织抽提的RNA为模板进行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物用BamHI和XhoI双酶酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pEGFP-N1中,用限制性内切酶酶切重组质粒pEGFP/NPM和DNA序列测定进行鉴定。用脂质体法将pEGFP/NPM导入肝癌细胞系HepG2中,G418选择培养,经免疫组织化学法和RT-PCR鉴定其表达。结果 RT-PCR扩增出长894bp的特异性片段,经克隆至pEGFP-N1后酶切鉴定证实,并测序表明序列与GenBank报道完全一致。pEGFP/NPM在HepG2细胞中有稳定表达。结论成功克隆了NPM的编码序列,构建了其真核细胞表达载体pEGFP/NPM/1,有助于对NPM基因在肝癌多药耐药中的机制做进一步研究。 |
| 关 键 词： | 肝肿瘤 抗药性 肿瘤 Nucleophosmin基因 |
Establishment of Nucleophosmin gene expression vector and its expression in human hepatocellular carcinoma strain HepG2 |
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| LI Hui-yu,LUO Fei,ZHAO Hao-liang,HE Jie-feng,XIAO Hong.Establishment of Nucleophosmin gene expression vector and its expression in human hepatocellular carcinoma strain HepG2[J].Chinese Remedies & Clinics,2010,10(8):868-870. | |
| Authors: | LI Hui-yu LUO Fei ZHAO Hao-liang HE Jie-feng XIAO Hong |
| Institution: | .(Department of General Surgery,the First Affiliated Hospital of Shanxi Medical University,Taiyuan 030001,China ) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Liver neoplasms Drug resistance neoplasm Nucleophosmin gene |
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