固相合成法合成葡萄球菌RNAⅢ抑制肽的鉴定 |
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引用本文: | 邢庆昌,郝立波,王继芳,姬志娟,王 蓉.固相合成法合成葡萄球菌RNAⅢ抑制肽的鉴定[J].中国神经再生研究,2009,13(13):2419-2422. |
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作者姓名: | 邢庆昌 郝立波 王继芳 姬志娟 王 蓉 |
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作者单位: | 解放军总医院第二附属医院,北京市 100091,解放军总医院骨科,北京市 100853,解放军总医院骨科,北京市 100853,宣武医院肽合成室,北京市 100053,宣武医院肽合成室,北京市 100053 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30640088)*;北京市自然科学基金资助项目(7082043)* |
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摘 要: | 背景:葡萄球菌感染和生物被膜形成受群体感应机制调控。葡萄球菌RNAⅢ抑制肽可以干预葡萄球菌群体感应系统,阻断葡萄球菌细胞间的信号传导通路,进而抑制葡萄球菌的毒素分泌和生物被膜形成,防治葡萄球菌感染。
目的:探讨葡萄球菌RNAⅢ抑制肽(RIP)的人工合成方法。
设计、时间及地点:单一样本观察。于2006-08/11在北京宣武医院中心实验室完成。
材料:Fmoc-AA、Pipredine、TFA、HMP购自美国MERCK公司;DCC、HOBT、DMAP购自美国ABI公司。
方法:采用固相合成法合成RNAⅢ抑制肽,HPLC法纯化,进行质谱分析法、酸水解法、红外光谱分析法和内酰胺酶活性测定法检测。
主要观察指标:①合成和纯化结果。②分子量测定结果。③组成成分分析结果。④氨基酸序列分析结果。⑤结构分析结果。⑥生物活性鉴定结果。
结果:合成的RNAⅢ抑制肽纯度为97.42%,相对分子质量为914.37, 与理论相对分子质量基本一致;与天然RNAⅢ抑制肽具有相同的氨基酸组分、氨基酸序列以及空间结构;生物活性检测证明合成RNAⅢ抑制肽具有和天然RNAⅢ抑制肽相同的功效,可以有效抑制细菌产生RNAⅢ。
结论:采用固相合成法成功合成RNAⅢ抑制肽,鉴定分析证实合成的多肽和天然RNAⅢ抑制肽蛋白具有相同的结构和功能。
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关 键 词: | 葡萄球菌 RNAⅢ抑制肽 合成 |
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