固相合成法合成葡萄球菌RNAⅢ抑制肽的鉴定

背景：葡萄球菌感染和生物被膜形成受群体感应机制调控。葡萄球菌RNAⅢ抑制肽可以干预葡萄球菌群体感应系统，阻断葡萄球菌细胞间的信号传导通路，进而抑制葡萄球菌的毒素分泌和生物被膜形成，防治葡萄球菌感染。 目的：探讨葡萄球菌RNAⅢ抑制肽(RIP)的人工合成方法。 设计、时间及地点：单一样本观察。于2006-08/11在北京宣武医院中心实验室完成。 材料：Fmoc-AA、Pipredine、TFA、HMP购自美国MERCK公司；DCC、HOBT、DMAP购自美国ABI公司。 方法：采用固相合成法合成RNAⅢ抑制肽，HPLC法纯化，进行质谱分析法、酸水解法、红外光谱分析法和内酰胺酶活性测定法检测。 主要观察指标：①合成和纯化结果。②分子量测定结果。③组成成分分析结果。④氨基酸序列分析结果。⑤结构分析结果。⑥生物活性鉴定结果。 结果：合成的RNAⅢ抑制肽纯度为97.42%，相对分子质量为914.37, 与理论相对分子质量基本一致；与天然RNAⅢ抑制肽具有相同的氨基酸组分、氨基酸序列以及空间结构；生物活性检测证明合成RNAⅢ抑制肽具有和天然RNAⅢ抑制肽相同的功效，可以有效抑制细菌产生RNAⅢ。 结论：采用固相合成法成功合成RNAⅢ抑制肽，鉴定分析证实合成的多肽和天然RNAⅢ抑制肽蛋白具有相同的结构和功能。