| 胰腺癌PANC1细胞microRNA-217靶基因ANLN的鉴定 |
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| 引用本文： | 江寅,侯宝华,简志祥,王慧玲,崔鹏,区金锐.胰腺癌PANC1细胞microRNA-217靶基因ANLN的鉴定[J].中华胰腺病杂志,2013,13(3):175-178. |
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| 作者姓名： | 江寅 侯宝华 简志祥 王慧玲 崔鹏 区金锐 |
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| 作者单位： | 510080广东广州,广东省人民医院普通外科,广东省医学科学院 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金(项目编号：2011010005036)卫生公益性行业科研专项经费项目(项目编号：201202007) |
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| 摘 要： | 目的 通过实验验证ANLN为microRNA-217(miR-217)的靶基因.方法 使用生物学软件预测miR-217调控的靶基因可能为ANLN.设计并合成mR-217结合的ANLN及突变型ANLN(mutANLN)序列,将其PCR扩增的片段插入表达质粒psiCHECK-2,构建重组质粒psiCHECK-2-ANLN及psiCHECK-2-mutANLN.采用脂质体法将2个重组质粒单独或分别与miR-217、miR-217 inhibitor及与人同源性远的miRNA序列(NC)、NC inhibitor共转染胰腺癌PANC1细胞,采用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性,采用蛋白质印迹法检测ANLN蛋白的表达.结果 转染psiCHECK-2-ANLN、psiCHECK-2-ANLN+miR-217、psiCHECK-2-ANLN+miR-217 inhibitor、psiCHECK-2-ANLN+NC、psiCHECK-2-ANLN+ NC inhibitor各组间的荧光素酶活性分别为2.221±0.188、0.769±0.061、3.764±0.371、2.265±0.201、2.242 ±0.018,差异有统计学意义(F =77.405,P＜0.01),但psiCHECK-2-ANLN组、psiCHECK-2-ANLN+ NC组及psiCHECK-2-ANLN+ NC inhibitor组两两比较差异无统计学意义,而psiCHECK-2-ANLN+ miR-217组的荧光素酶活性较这3组明显下降,psiCHECK-2-ANLN+miR-217inhibitor组活性较其他4组明显升高(P值均＜0.01).转染psiCHECK-2-mutANLN各组间荧光素酶活性差异无统计学意义(P=0.053).psiCHECK-2-ANLN+ miR-217共转染组PANC1细胞的ANLN蛋白表达水平较单纯转染psiCHECK4-ANLN组细胞的ANLN蛋白表达明显下调.结论 在胰腺癌中,ANLN可能是miR-217的直接靶基因.
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| 关 键 词： | 胰腺肿瘤 微RNAs miR-217 基因 ANLN |
Identification of microRNA-217 targeted gene ANLN in pancreatic cancer PANC1 cells |
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| Authors: | JIANG Yin HOU Bao-hua JIAN Zhi-xiang WANG Hui-ling CUI Peng OU Jin-rui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pancreatic neoplasms MicroRNAs miR-217 Gene ANLN |
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