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喉癌顺铂耐药细胞株的建立及干性生物学特性分析
引用本文:于锋,龚小蓉,周毅波. 喉癌顺铂耐药细胞株的建立及干性生物学特性分析[J]. 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志, 2018, 24(1): 39-44
作者姓名:于锋  龚小蓉  周毅波
作者单位:广州医科大学耳鼻咽喉头颈外科研究所 广州市耳鼻咽喉头颈外科医院 广州市第十二人民医院 耳鼻咽喉头颈外科,广东广州510620
基金项目:广州市喉癌临床医学与转化中心试点建设项目(201604020005)
摘    要:摘要:目的建立人喉癌顺铂(CDDP)耐药细胞株并鉴定其干细胞生物学特性,探讨其对CDDP耐药机制及与干细胞的关系。方法以药物浓度梯度递增法诱导建立人喉癌Hep 2的顺铂耐药细胞株Hep 2/CDDP;倒置显微镜观察细胞的形态;CCK 8法检测细胞IC50及耐药指数;无血清细胞球体培养观察成球能力;实时定量RT qPCR法检测MDRl/P gp、ABCG2、CD44、CD133 mRNA的表达情况;Western blot法检测MDRl/P gp、ABCG2、CD44、CD133蛋白表达情况。结果顺铂体外缓慢诱导历时12个月建成的Hep 2/CDDP耐药细胞株,与亲本Hep 2细胞相比,细胞形态改变明显;耐药性能稳定耐药指数为5.43;无血清球体培养实验示细胞成球率升高(P<0.05);RT qPCR和Western blot结果表明耐药相关基因MDRl/P gp、ABCG2表达上调(均P<0.05);干性相关标记基因CD44、CD133升高(均P<0.05)。结论Hep 2/CDDP细胞株具有稳定的顺铂耐药性,是研究喉癌顺铂耐药和逆转机制的良好模型,且其耐药机制与顺铂诱导的肿瘤干细胞有关,可为研究逆转耐药提供参考。

关 键 词:顺铂|喉癌|耐药|干细胞

Establishment of a cisplatin resistant human laryngeal carcinoma cell line and its stem cell biological characteristics
Abstract:
Keywords:Cisplatin|Laryngeal neoplasm| Dug resistance| Stem cell
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