Treg细胞中关键转录因子Foxp3相互作用蛋白的鉴定与分析

目的鉴定Treg细胞中Foxp3相互作用蛋白。方法构建包含SBP和Protein G结合肽的Tags的Foxp3 knock-in转基因小鼠,分选Treg细胞,用亲和磁珠法纯化Foxp3相互作用蛋白复合体,质谱测序鉴定复合体蛋白组分并进行蛋白质组学分析和蛋白相互作用的验证。结果流式细胞分选的Treg纯度超过90%;经过亲和磁珠法纯化和质谱分析显示Foxp3有100个以上候选相互作用蛋白伙伴;免疫共沉淀方法初步鉴定部分伙伴蛋白间可相互结合。结论本研究在小鼠体内Treg细胞中初步获得Foxp3候选相互作用蛋白并证实部分蛋白间可相互作用,为这些蛋白对Treg细胞的功能鉴定提供基础。