膝关节滑膜间质干细胞分离、培养及其多向分化潜能特性的研究 |
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引用本文: | 芮云峰,王友,汤亭亭,汪洋,杜琳,戴魁尅.膝关节滑膜间质干细胞分离、培养及其多向分化潜能特性的研究[J].中华骨科杂志,2009,29(4). |
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作者姓名: | 芮云峰 王友 汤亭亭 汪洋 杜琳 戴魁尅 |
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作者单位: | 上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科,200011 |
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摘 要: | 目的 探讨晚期骨关节炎患者膝关节滑膜间质干细胞(synovium-derived mesenchymalstem cells,SMSCs)体外分离、培养的可行性及其在体外向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞定向分化的特性.方法 取膝关节滑膜组织,胶原酶消化获得有核细胞.挑选单细胞克隆,筛选获得SMSCs.流式细胞技术检测细胞表面特异性抗原标志.培养至第三代,分别向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞诱导分化.油红O染色鉴定向脂肪细胞分化;碱性磷酸酶染色、茜素红染色鉴定向成骨细胞分化;甲苯胺蓝染色鉴定向软骨细胞分化.RT-PCR检测脂肪细胞、成骨细胞标志基因.Ⅱ型胶原免疫组化染色检测软骨细胞Ⅱ型胶原的表达.结果 原代SMSCs体外培养呈葵花样细胞集落,传代后可见圆形巨噬样细胞和纺锤形成纤维样细胞,融合后呈成纤维细胞样生长.CD44、CD90呈阳性,CD34、CD71和CD45呈阴性.向脂肪细胞诱导21d,油红O染色阳性;RT-PCR检测有脂蛋白酶、乙二腈及PPARγ2表达;向成骨细胞诱导7、28 d,ALP,茜素红染色阳性,有ALP、Osteopontin及Osteocalcin表达;向软骨细胞诱导21d,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性.结论 晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织可以分离、培养获得SMSCs. SMSCs具有向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞发生定向分化的潜能.
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关 键 词: | 滑膜 间质干细胞 细胞分化 脂细胞 成骨细胞 软骨细胞 |
Culture of human synovinm-derived mesenchymal stem cells from human knee joint and its multipo-tent differentiation in vitro |
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Abstract: | |
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Keywords: | Synovial membrane Mesenchymal stem cell Cell differentiation Adipocytes Os-teoblasts Chondrocytes |
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