肿瘤坏死因子-α致体外肝细胞凋亡效应的研究

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对HepG2细胞的致凋亡作用.方法 利用HepG2细胞作为体外肝细胞模型,HepG2细胞经TNF-α(400U/ml)作用12、24、48 h后,分别测定培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量.选择TNF-α作用24 h的细胞,电镜观察细胞形态,检测DNA 梯形条带,采用原位末端标记技术(TUNEL)、流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 TNF-α作用24 h后,培养上清中LDH轻度增高;电镜观察发现部分细胞出现典型的细胞凋亡形态改变;细胞内片段化DNA经琼脂糖凝胶电泳后出现了典型的DNA 梯形条带;TUNEL法绝大多数细胞核呈棕褐色阳性染色,而对照组无阳性染色;用Apo2.7抗体标记凋亡细胞后经流式细胞仪检测,阳性比例达98.37%,而对照组阳性比例为16.52%.结论 TNF-α可引起HepG2细胞凋亡.