| 真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI在搭桥模型移植静脉中的表达 |
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| 引用本文： | 厉泉,张凯伦,蒋雄刚,孙图成,龚永生,祖育昆,郭超,徐鹏.真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI在搭桥模型移植静脉中的表达[J].中国老年学杂志,2008,28(7):628-630. |
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| 作者姓名： | 厉泉 张凯伦 蒋雄刚 孙图成 龚永生 祖育昆 郭超 徐鹏 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院心外科,湖北,武汉,430022 |
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| 摘 要： | 目的构建真核表达载体pCMV-（Kozak）TFPI并检测其在移植静脉中的表达，为冠状动脉旁路移植术中转染大隐静脉内皮细胞抗凝治疗的临床试验奠定理论应用基础。方法用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）的方法提取人组织因子途径抑制因子（TFPI）基因，并引入Kozak序列，将（Kozak）TFPI亚克隆入pCMV质粒中。在阳离子脂质体介导下，转染颈总动脉搭桥模型移植静脉内皮细胞。RT-PCR、蛋白印迹法（Western印迹）和免疫组化法检测移植静脉中外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达。结果（Kozok）TFPI成功克隆入pCMV中。RT-PCR、Western印迹和免疫组化检测到移植静脉中外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达。结论pCMV-（Kozak）TFPI真核表达载体构建成功，移植静脉中检测到其蛋白的表达。
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| 关 键 词： | 冠状动脉旁路移植术 组织因子途径抑制因子 移植静脉 转染 真核表达载体构建 TFPI 动脉搭桥 模型 移植静脉 vector plasmid Expression model bypass graft 免疫组化检测 亚克隆 结果 蛋白印迹法 Mrna 中外 免疫组化法 Western 脂质体介导 阳离子 |
| 文章编号： | 1005-9202(2008)07-0628-03 |
| 修稿时间： | 2007年6月29日 |
Expression of eukaryotic expressed plasmid vector pCMV-(Kozak)TFPI in vein grafts of bypass graft model |
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