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人源血管内皮生长因子突变体的克隆、分离纯化及活性研究
引用本文:周红霞, 周梅仙, 吴洁, 胡卓逸, 刘景晶. 人源血管内皮生长因子突变体的克隆、分离纯化及活性研究[J]. 中国药科大学学报, 2006, 37(3): 273-276.
作者姓名:周红霞  周梅仙  吴洁  胡卓逸  刘景晶
作者单位:1.中国药科大学生命科学与技术学院;2.南京晓庄学院生命科学系
摘    要:目的:为获得大量人源血管内皮生长因子突变体(hVEGF121′)的重组蛋白,本文研究了其发酵条件,分离纯化方法,并初步考察了其生物活性。方法:应用PCR介导的定点突变方法,将hVEGF121中对其活性影响较小的1~8位和115~121位两个肽段替换成破伤风毒素(TT)的两个强表位肽段618~627位和831~837位,构建高效表达的pET28a/hVEGF121′重组质粒,考察诱导条件对目的蛋白表达量的影响;所得包含体经过DEAE-Cellulose离子交换柱纯化;初步比较了VEGF121和突变体VEGF121′的免疫和抗肿瘤效果。结果:最佳表达条件为:乳糖诱导时间6 h,诱导浓度2 mmol/L;离子交换纯化后可得到电泳纯的突变体hVEGF121′;初步的动物免疫发现突变体VEGF121′和VEGF121有相近的免疫滴度,但前者抗肿瘤效果更显著。结论:经发酵纯化后得到重组人源血管内皮生长因子突变体(hVEGF121′)的纯品,并初步展现良好的抗肿瘤效果。

关 键 词:血管内皮生长因子  突变体  纯化  免疫原性  抗肿瘤
文章编号:1000-5048(2006)03-0273-04
收稿时间:2005-10-12
修稿时间:2005-10-12

Cloning, purification and activity of mutant human vascular endothelial growth factor (hVEGF)
ZHOU Hong-xi,ZHOU Mei-xian,WU Jie,Hu Zhuo-yi,LIU Jing-jing. Cloning, purification and activity of mutant human vascular endothelial growth factor (hVEGF)[J]. Journal of China Pharmaceutical University, 2006, 37(3): 273-276
Authors:ZHOU Hong-xi  ZHOU Mei-xian  WU Jie  Hu Zhuo-yi  LIU Jing-jing
Abstract:
Keywords:VEGF   mutant   purification   immumogenecity   anti-tumor
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