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| 抗细粒棘球蚴人工重组B抗原人源单链可变区抗体的筛选与在原核系统中的表达 | |
| 引用本文： | 陈新华,温浩,张耀新,钟彦伟,成军,李克,王琳.抗细粒棘球蚴人工重组B抗原人源单链可变区抗体的筛选与在原核系统中的表达[J].中国病原生物学杂志,2002,15(4):224-227. |
| 作者姓名： | 陈新华 温浩 张耀新 钟彦伟 成军 李克 王琳 |
| 作者单位： | 1. 新疆维吾尔自治区包虫病临床研究所,新疆乌鲁木齐,830054 2. 新疆医科大学一附院传染科 3. 解放军302医院基因治疗中心 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (No.30 1 60 0 81 )~~ |
| 摘 要： | 目的 筛选并表达抗细粒棘球蚴人工重组 B抗原 (r- Ag B)的人源单链可变区抗体 (Sc Fv) ,为细粒棘球蚴 B抗原蛋白质功能的研究及包虫病的基因治疗开辟新途径。 方法 采用噬菌体表面展示技术 ,以重组纯化的细粒棘球蚴 B抗原为固相抗原 ,经过 5轮“吸附 -洗脱 -扩增”的筛选过程 ,从半合成的噬菌体抗体库中获得了抗原结合活性和特异性较强的含抗 r- Ag B的 Sc Fv基因片段的阳性克隆 ,提取质粒 ,经 Sfi /Not 酶切鉴定后 ,亚克隆到 p CANTAB5 E载体上 ,转化大肠杆菌 XL1 - Blue,经 IPTG诱导 ,表达可溶性 Sc Fv。 结果 筛选得到的 Sc Fv片段基因为 76 8bp,经 SDS- PAGE鉴定 ,在大肠杆菌 XL1 - Blue中表达的 Sc Fv分子质量约 2 8ku,经过 EL ISA和 Western- Blot检测 ,该单链抗体具有较强的抗原结合特性和特异性。 结论 细粒棘球蚴重组 B抗原人源单链可变区抗体筛选和表达成功 ,为今后包虫病人源抗体的研究和应用奠定了基础 |
| 关 键 词： | 噬菌体展示 人源单链可变区抗体 细粒棘球蚴重组B抗原 表达 |
| 文章编号： | 1001-6627(2002)04-0224-04 |
| 修稿时间： | 2001年11月8日 |
SCREENING AND EXPRESSION IN PRONUCLEUS SYSTEM OF HUMAN PHAGE ANTIBODY AGAINST RECOMBINANT ANTIGEN B OF ECHINOCOCCUS GRANULOSUS |
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| CHEN Xin hua ,WEN Hao ,ZHANG Yao xin ,ZHONG Yan wei ,CHENG Jun ,LI Ke ,WANG Lin.SCREENING AND EXPRESSION IN PRONUCLEUS SYSTEM OF HUMAN PHAGE ANTIBODY AGAINST RECOMBINANT ANTIGEN B OF ECHINOCOCCUS GRANULOSUS[J].Journal of Pathogen Biology,2002,15(4):224-227. | |
| Authors: | CHEN Xin hua WEN Hao ZHANG Yao xin ZHONG Yan wei CHENG Jun LI Ke WANG Lin |
| Institution: | CHEN Xin hua 1,WEN Hao 1,ZHANG Yao xin 2,ZHONG Yan wei 3,CHENG Jun 3,LI Ke 3,WANG Lin 3 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Phage display human variable single chain of antibody recombinant antigen B of Echinococcus granulosus expression |
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