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富血小板血浆对大鼠许旺细胞生物学行为的影响
引用本文:郑灿镔,朱庆棠,刘小林,黄喜军,何彩凤,江丽,周翔,朱昭炜. 富血小板血浆对大鼠许旺细胞生物学行为的影响[J]. 中华显微外科杂志, 2013, 36(2): 137-143
作者姓名:郑灿镔  朱庆棠  刘小林  黄喜军  何彩凤  江丽  周翔  朱昭炜
作者单位:1. 中山大学附属第一医院显微创伤骨科, 广州,510080
2. 广州中大医疗器械有限公司
3. 中山大学附属第一医院骨科研究所
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划,2012AA020507):国家自然科学基金(项目编号:30700847),广东省自然科学基金重点项目(项目编号:9251008901000017)中山大学先进技术研究院"面向产业发展的关键技术研究与应用"项目(项目编号:90035-3283312)
摘    要:目的 观察不同浓度的富血小板血浆(PRP)对体外培养的许旺细胞(SCs)增殖、分泌功能及迁移的影响,探讨其促进周围神经再生的可能作用机制. 方法 从SD大鼠心脏穿刺取血,利用二次离心法制备PRP,对全血和PRP中血小板计数和血小板源性生长因子BB (PDGF-BB)和转化生长因子(TGF-β1)浓度测定;取3~5d龄的大鼠坐骨神经培养纯化SCs,将P1细胞分为实验组与对照组分别进行处理,实验组以含40.0%、20.0%、10.0%、5.0%和2.5% PRP的条件培养液干预,并设立空白对照组.于干预不同时间点采用CCK-8法测定SCs增殖活性情况,用实时荧光定量PCR方法检测细胞神经生长因子(NGF)和胶质细胞源神经营养因子(GDNF) mRNA表达的变化,ELISA检测SCs分泌NGF和GDNF的水平,Transwell小室检测各组SCs的迁移能力. 结果 PRP血小板回收率达65%,PDGF-BB和TGF-β1浓度明显高于血清(P<0.01);与空白对照组相比,低于20 0%浓度的PRP呈浓度依赖性促进SCs增殖和迁移,而40.0%浓度组细胞增殖和迁移受到抑制;SCs分泌的NGF和GDNF和其mRNA表达均较对照组明显增加,同样在低于20.0%浓度的范围内呈现量效关系,40.0%浓度组则显示抑制作用.结论 PRP在适当浓度范围可以促进SCs的分裂增殖,合成分泌NGF和GDNF以及迁移的能力,具有潜在的促周围神经再生的作用.

关 键 词:富血小板血浆  神经生长因子  许旺细胞  细胞增殖  细胞迁移  周围神经

Effect of platelet-rich plasma concentration on biological behavior of Schwann cells in vitro
Abstract:
Keywords:Platelet-rich plasma  Nerve growth factor  Schwann cells  Cell proliferation  Cell migration  Peripheral nerve
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