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弓形虫依钙蛋白激酶Calpain—like基因的克隆及表达
引用本文:陈雪艳,付玉才,李璐,耿艺介,黄达娜,高世同,张仁利. 弓形虫依钙蛋白激酶Calpain—like基因的克隆及表达[J]. 热带医学杂志, 2008, 8(10)
作者姓名:陈雪艳  付玉才  李璐  耿艺介  黄达娜  高世同  张仁利
作者单位:1. 深圳市疾病预防控制中心,深圳,518020;汕头大学医学院,汕头,515041
2. 汕头大学医学院,汕头,515041
3. 深圳市疾病预防控制中心,深圳,518020
摘    要:目的克隆弓形虫RH株Calpain-like基因片段,构建原核表达载体,诱导表达Calpain-like基因重组蛋白。方法收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA,在设计合成的引物中引入SalⅠ和EcoRⅠ酶切位点。应用RT-PCR扩增弓形虫RH株Calpain-like基因片段,插入pGEM-T载体,提取重组质粒,双酶切获得目的基因,亚克隆到原核表达质粒pET32a,重组子经双酶切、PCR和DNA序列分析鉴定,转化大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达。结果从弓形虫RH株速殖子cDNA中扩增出316bp的Calpain-like基因片段;含pET32a/Calpain-like的重组质粒在宿主菌经诱导后,获得与预期分子量相符的表达产物。结论成功地克隆和表达弓形虫RH株Calpain-like基因,弓形虫Calpain-like基因的克隆表达为进一步筛选弓形虫疫苗候选分子和治疗药物的靶位提供了研究基础。

关 键 词:弓形虫  Calpain-like基因  基因克隆  蛋白表达

Cloning and Expression of Caipain-like Gene in Toxoplasma gondii
CHEN Xue-yan,FU Yu-cai,LI Lu,GENG Yi-jie,HUANG Dana,GAO Shi-tong,ZHANG Ren-li. Cloning and Expression of Caipain-like Gene in Toxoplasma gondii[J]. Journal Of Tropical Medicine, 2008, 8(10)
Authors:CHEN Xue-yan  FU Yu-cai  LI Lu  GENG Yi-jie  HUANG Dana  GAO Shi-tong  ZHANG Ren-li
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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