| 人白细胞介素33基因的克隆表达及其生物学活性的研究 |
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| 引用本文： | 姜艳芳,王朝霞,辛桂杰,李玉斌,牛俊奇. 人白细胞介素33基因的克隆表达及其生物学活性的研究[J]. 中国免疫学杂志, 2009, 25(2) |
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| 作者姓名： | 姜艳芳 王朝霞 辛桂杰 李玉斌 牛俊奇 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学第一医院肝病科,长春,130021
2. Division of Immunology,Infection and Inflammation,Level 4/Room 21,Glasgow Biomedical Research Centre,University of Glasgow,British |
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| 摘 要： | 目的:克隆人白细胞介素33(human interleukin-33,hIL-33)基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株,并对纯化的蛋白进行生物活性的初步测定.方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术从人成纤维细胞总RNA中反转录并扩增得到人的成熟肽IL-33基因;采用基因克隆技术,构建PQE30-IL33重组质粒;采用Ni2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白;应用ELISA方法检测纯化蛋白诱导产生的IL-4和IL-5.结果:SDS-PAGE分析显示表达蛋白约占菌体总蛋白的25%,Western印迹法证实重组蛋白为特异性蛋白,纯化后纯度达到95%以上.表达的重组蛋白IL-33促进人外周血单个核细胞产生IL-4和IL-5,浓度分别达到(106±2.6)pg/ml和(1 220±10.4)pg/ml,而未刺激对照组的浓度只有(32.2±2.3)pg/ml和(67.3±2.5)pg/ml.结论:成功构建出hIL-33的原核表达载体,诱导产生蛋白能诱导IL-4和IL-5细胞因子的产生.
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| 关 键 词： | 白细胞介素-33 克隆与表达 大肠杆菌 生物活性 |
Expression of Human Interleukin-33 and studies on its biology function |
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| JIANG Yan-Fang,WANG Zhao-Xia,XIN Gui-Jie,LI Yu-Bin,NIU Jun-Qi. Expression of Human Interleukin-33 and studies on its biology function[J]. Chinese Journal of Immunology, 2009, 25(2) |
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| Authors: | JIANG Yan-Fang WANG Zhao-Xia XIN Gui-Jie LI Yu-Bin NIU Jun-Qi |
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