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重组真核质粒pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1~4)的构建和表达
引用本文:付晓,朱梦瑜,高星杰,钱宝鑫,王保亚,赵虹,葛林,杨洁. 重组真核质粒pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1~4)的构建和表达[J]. 天津医药, 2011, 39(2): 97-100
作者姓名:付晓  朱梦瑜  高星杰  钱宝鑫  王保亚  赵虹  葛林  杨洁
作者单位:1. 天津医科大学免疫教研室,300070
2. 天津医科大学基础医学研究中心,300070
3. 天津医科大学生化教研室,300070
4. 300070,天津医科大学基础医学研究中心;300070,天津医科大学生化教研室
基金项目:国家科技部"863"项目,国家自然科学基金资助项目,天津市科委国际合作项目,国家自然科学重大研究计划培育项目,国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金,天津市教委重点项目,天津医科大学科学基金
摘    要:目的:将人类Tudor-SN蛋白SN(1~4)基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法将目的片段连接到pERFP-C1载体上,再将构建成功的pERFP-C1-Tudor-SN-SN(1~4)重组质粒转染入HeLa细胞内,在荧光显微镜下观察红色荧光蛋白的表达。结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜下观察到红色融合蛋白的表达。结论:重组pERFP-C1-h Tudor-SN-SN(1~4)质粒构建及表达成功。

关 键 词:质粒  遗传载体  发光蛋白质类  重组融合蛋白质类  转染  HeLa细胞  人类Tudor-SN蛋白

Construction and Expression of pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1-4) Recombinant Eukaryotic Plasmids
FU Xiao,ZHU Mengyu,GAO Xingjie,QIAN Baoxin,WANG Baoya,ZHAO Hong,GE Lin,YANG Jie. Construction and Expression of pERFP-C1-hTudor-SN-SN(1-4) Recombinant Eukaryotic Plasmids[J]. Tianjin Medical Journal, 2011, 39(2): 97-100
Authors:FU Xiao  ZHU Mengyu  GAO Xingjie  QIAN Baoxin  WANG Baoya  ZHAO Hong  GE Lin  YANG Jie
Affiliation:FU Xiao,ZHU Mengyu,GAO Xingjie,QIAN Baoxin,WANG Baoya,ZHAO Hong,GE Lin,YANG JieDepartment of Immunology,Tianjin Medical University,Tianjin 300070,China
Abstract:
Keywords:plasmids genetic vectors luminescent proteins recombinant fusion proteins transfection HeLa cells human Tudor-SN protein  
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