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BMP7和EGFP重组腺病毒体外转染兔骨髓间充质干细胞的研究
引用本文:刘永亮,叶钢,易善红,方针强,张英晨. BMP7和EGFP重组腺病毒体外转染兔骨髓间充质干细胞的研究[J]. 四川医学, 2008, 29(2): 129-131
作者姓名:刘永亮  叶钢  易善红  方针强  张英晨
作者单位:第三军医大学新桥医院泌尿外科,全军肾脏病中心,重庆,400037;中国人民解放军第148医院泌尿外科,山东,淄博,255300
摘    要:目的 观测体外培养的兔骨髓间充质干细胞生物学特性,并转染重组腺病毒Ad5-EGFP-BMP7,观察BMP7与EGFP的表达情况.方法 通过密度梯度离心联合贴壁法,分离、纯化间充质干细胞;流式细胞仪检测细胞周期和表面标记;体外诱导间充质干细胞向成骨细胞、成脂肪细胞分化并鉴定.转染后,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测外源基因的表达.结果 原代及传代间充质干细胞为成纤维细胞样细胞;87%以上处于G0/G1期;CD44表达阳性,CD45表达阴性;经成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶染色阳性,并有矿化结节形成;经成脂肪细胞诱导后,细胞内出现大量脂滴.转染Ad5-EGFP-BMP7后,荧光显微镜下可见EGFP表达阳性;免疫细胞化学染色显示细胞内BMF7表达阳性.结论 成功分离、纯化间充质干细胞,并鉴定其具有成体干细胞特性;重组腺病毒介导BMP7和EGFP体外成功转染间充质干细胞,并稳定表达BMP7、EGFP,为下一步实验奠定了基础.

关 键 词:骨髓间充质干细胞  骨形态发生蛋白7  增强型绿色荧光蛋白  基因转染
文章编号:1004-0501(2008)02-0129-03
收稿时间:2007-10-26
修稿时间:2007-10-26

Study of BMP7 and EGFP reconbinant adenovirus transfection on rabbit bone marrow derived mesenchymal stem cells in vitro
LIU Yong-liang , YE Gang, YI Shan-hong ,et al.. Study of BMP7 and EGFP reconbinant adenovirus transfection on rabbit bone marrow derived mesenchymal stem cells in vitro[J]. Sichuan Medical Journal, 2008, 29(2): 129-131
Authors:LIU Yong-liang    YE Gang   YI Shan-hong   et al.
Affiliation:LIU Yong-liang , YE Gang, YI Shan-hong , et al.
Abstract:
Keywords:bone marrow derived mesenchymal stem cells   bone morphogenetic protein7   enhanced green fluorescent protein   gene transfection
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