几种固定化苯丙氨酸解氨酶方法的比较

目的：对不同方法固定化苯丙氨酸解氨酶（PAL）的偶联率或包被率以及固定化对PAL活性和稳定性的影响进行比较，以期得到较为方便、有效的固定化PAL。方法：（1）采用不同T：C比例的聚丙烯酰胺凝胶（PAG）包埋PAL；（2）分别用戊二醛和碘化－I－[环己基－3－（3－二甲氨丙基）]碳二亚胺（CDC）将PAL固定于Bio-Gel P-300；（3）分别用超声法、脱水再加水法、复乳法将PAL包被于三种脂类组成不同的质脂体；（4）对诱变选育出的含PAL活性酵母细胞进行丙酮处理。结论：（1）包埋法采用T：C比为8：30时固定化酶活性明显高于PAL活性酵母细胞进行丙酮处理。结论：（1）包埋法采用T：C法为8：30时固定化酶活性明显高于T：C比为8：19，两活性保留率分别为50．6％和17．1％；（2）载体偶联法以戊二醛将PAL固定于Bio-Gel P300优于用DCD固定化的酶，两活性保留率分别为27．2％和13．9％；（3）质脂体包被中以脱水再加水法对酶活性影响较小，脂类组成以磷脂酰胆碱；胆固醇：磷脂酰丝氨酸比值7：21：1最好；（4）固定化PAL活性酵母细胞能较好地抵抗人工肠液中胰蛋白酶的水解作用，亦能明显降低苯丙氨酸的浓度。