| 可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体基因的克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 岑洪,林茂芳,黄河,蔡真.可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体基因的克隆和原核表达[J].中国病理生理杂志,2006,22(2):412-414. |
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| 作者姓名： | 岑洪 林茂芳 黄河 蔡真 |
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| 作者单位： | 浙江大学医学院第一附属医院血液科骨髓移植中心， 浙江 杭州 310003 |
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| 基金项目： | 浙江省科技攻关重点项目(No.2003C23015) |
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| 摘 要： | 目的：克隆可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体（sMR）基因，在大肠杆菌中表达，经纯化、复性后获得活性蛋白。 方法： 从人骨髓细胞中提取总RNA，在sMR基因引物两端分别加上NdeI和BamHI酶切位点，利用RT-PCR技术扩增sMR基因，经NdeⅠ和BamHⅠ酶切后连接到表达载体pET28a，测序证实克隆基因的正确性，并在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达，采用his-tag纯化柱纯化目的蛋白，并经复性处理，配体结合实验证实蛋白活性。 结果： 限制性内切酶切出了预期条带，测序证实了克隆基因的正确性，sMR经诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达，表达蛋白经纯化和复性处理，获得了具有活性的功能蛋白。 结论： 成功克隆与表达了sMR基因，得到了具有活性的功能蛋白，为进一步研究其生物学功能和应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 受体 可溶性巨噬细胞集落刺激因子 克隆 原核表达 pET-28a（+） 蛋白质复性 |
| 文章编号： | 1000-4718（2006）02-0412-03 |
| 收稿时间： | 2004-05-26 |
| 修稿时间： | 2004-05-262004-11-08 |
Cloning and expression of the soluble M - CSF receptor gene in E. coli |
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| CEN Hong,LIN Mao-fang,HUANG He,CAI Zhen.Cloning and expression of the soluble M - CSF receptor gene in E. coli[J].Chinese Journal of Pathophysiology,2006,22(2):412-414. |
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| Authors: | CEN Hong LIN Mao-fang HUANG He CAI Zhen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pET-28a( ) |
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