低氧对人白血病细胞株HL-60细胞增殖及HIF-1α表达的影响

目的探讨模拟低氧环境对人白血病细胞株HL-60细胞增殖及低氧诱导因子表达的影响。方法常规方法复苏、传代培养细胞,待细胞进入对数生长期后用于实验。将细胞分为低氧处理组和常氧对照组,常氧对照组采取常规培养,低氧处理组分别用50、200、400、800μmol/L二氯化钴(CoC12)处理,并于24、48、72 h收集细胞进行以下指标检测:≧倒置相差显微镜观察细胞形态变化;≧MTT比色法检测细胞增殖抑制率;≧实时荧光定量PCR检测HIF-1α在转录水平的表达。结果 1:低氧模拟环境下,细胞在形态上呈较明显变化,并随CoCl2浓度和处理时间的延长变化显著;2:MTT实验结果显示,与常氧对照组比较,CoCl2处理组均产生明显抑制作用,抑制率随着药物浓度增加而增大;3:实时荧光定量PCR结果表明,与对照组(24 h)相比,50μmol/L CoCl2和200μmol/L CoCl2低浓度处理组HIF-1αmRNA的表达均有上调,且上调呈剂量和时间依赖关系。结论 1:CoCl2模拟低氧后,细胞生长明显受抑;2:低浓度(50~200μmol/L)CoCl2组HIF-1αmRNA表达上调并呈现时间、浓度依赖性;3:本研究涉及的低氧模拟环境对HL-60细胞未引起明显的诱导分化现象。