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重组起搏基因质粒构建生物起搏器的实验研究
引用本文:Niu P,Huang CX,Zhao YQ,Yang B,Zhao QY,Wang T,Fan GH. 重组起搏基因质粒构建生物起搏器的实验研究[J]. 中华心血管病杂志, 2006, 34(12): 1126-1130
作者姓名:Niu P  Huang CX  Zhao YQ  Yang B  Zhao QY  Wang T  Fan GH
作者单位:1. 430060,武汉大学人民医院心内科
2. 430060,武汉大学人民医院整形外科
3. 430060,武汉大学人民医院心外科
摘    要:目的研究旨在构建重组起搏基因质粒pIRES2-EGFP-HCN2,并检测其在体外心房肌细胞及犬病态窦房结综合征(病窦)模型体内的表达。方法对含mHCN2cDNA的PTR载体进行转化和扩增,将所得mHCN2基因定向克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,进行双酶切来鉴定克隆的正确性。将重组质粒用电穿孔法转染心房肌细胞,同时直接注射至犬病窦模型的窦房结区域,体表心电图监测犬窦房结功能改善情况,并通过荧光显微镜及RT-PCR检测重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2在体内外的表达。而对照组仅注射生理盐水。结果构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2。荧光显微镜下可见转染后的心房肌细胞呈绿色荧光,其搏动频率较未转染的细胞明显增快[(180±11)次/min与(140±14)次/min,P<0.05]。注射组织的冰冻切片显示绿色荧光蛋白,RT-PCR显示了mHCN2基因片段,体表心电图显示犬窦房结功能改善[(150±13)次/min与(105±17)次/min,P<0.05]。而对照组始终未见到绿色荧光蛋白表达及窦房结功能改善。结论成功构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2,并在体外心房肌细胞及犬病窦模型体内成功表达,为生物起搏的研究奠定基础。

关 键 词:基因转移技术 病窦综合征 基因疗法
收稿时间:2006-06-08
修稿时间:2006-06-08

Recombinant plasmid pIRES2-EGFP-HCN2 improved pacing function in canine model of sick sinus syndrome
Niu Ping,Huang Cong-Xin,Zhao Yue-Qiang,Yang Bo,Zhao Qing-Yan,Wang Teng,Fan Guo-Hua. Recombinant plasmid pIRES2-EGFP-HCN2 improved pacing function in canine model of sick sinus syndrome[J]. Chinese Journal of Cardiology, 2006, 34(12): 1126-1130
Authors:Niu Ping  Huang Cong-Xin  Zhao Yue-Qiang  Yang Bo  Zhao Qing-Yan  Wang Teng  Fan Guo-Hua
Affiliation:Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, China.
Abstract:
Keywords:Gene transfer techniques   Sick sinus syndrome   Gene therapy
本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录!
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