|
|||||
|
|
| 重组起搏基因质粒构建生物起搏器的实验研究 | |
| 作者姓名： | Niu P Huang CX Zhao YQ Yang B Zhao QY Wang T Fan GH |
| 作者单位： | 1. 430060,武汉大学人民医院心内科 2. 430060,武汉大学人民医院整形外科 3. 430060,武汉大学人民医院心外科 |
| 摘 要： | 目的研究旨在构建重组起搏基因质粒pIRES2-EGFP-HCN2,并检测其在体外心房肌细胞及犬病态窦房结综合征(病窦)模型体内的表达。方法对含mHCN2cDNA的PTR载体进行转化和扩增,将所得mHCN2基因定向克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,进行双酶切来鉴定克隆的正确性。将重组质粒用电穿孔法转染心房肌细胞,同时直接注射至犬病窦模型的窦房结区域,体表心电图监测犬窦房结功能改善情况,并通过荧光显微镜及RT-PCR检测重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2在体内外的表达。而对照组仅注射生理盐水。结果构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2。荧光显微镜下可见转染后的心房肌细胞呈绿色荧光,其搏动频率较未转染的细胞明显增快(180±11)次/min与(140±14)次/min,P<0.05]。注射组织的冰冻切片显示绿色荧光蛋白,RT-PCR显示了mHCN2基因片段,体表心电图显示犬窦房结功能改善(150±13)次/min与(105±17)次/min,P<0.05]。而对照组始终未见到绿色荧光蛋白表达及窦房结功能改善。结论成功构建了重组质粒pIRES2-EGFP-HCN2,并在体外心房肌细胞及犬病窦模型体内成功表达,为生物起搏的研究奠定基础。 |
| 关 键 词： | 基因转移技术 病窦综合征 基因疗法 |
| 收稿时间： | 06 8 2006 12:00AM |
| 修稿时间： | 2006年6月8日 |
Recombinant plasmid pIRES2-EGFP-HCN2 improved pacing function in canine model of sick sinus syndrome |
|
| Niu P,Huang CX,Zhao YQ,Yang B,Zhao QY,Wang T,Fan GH.Recombinant plasmid pIRES2-EGFP-HCN2 improved pacing function in canine model of sick sinus syndrome[J].Chinese Journal of Cardiology,2006,34(12):1126-1130. | |
| Authors: | Niu Ping Huang Cong-Xin Zhao Yue-Qiang Yang Bo Zhao Qing-Yan Wang Teng Fan Guo-Hua |
| Institution: | Department of Cardiology, Renmin Hospital of Wuhan University, Wuhan 430060, China. |
| Abstract: | |
| Keywords: | Gene transfer techniques Sick sinus syndrome Gene therapy |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 PubMed 等数据库收录！ | |