急性排斥期静脉注射供体脾脏细胞对异体小鼠皮片存活的影响

【目的】研究急性排斥期静脉注射供体脾细胞对异体小鼠皮片存活的影响,并初步探讨其机制。【方法】96只受体C57BL/6小鼠随机分为A组(阳性对照组)、B组(实验组)、C组(对照组)、D组(阴性对照组),每组24只。各组小鼠均进行同种异体皮片移植,A组移植后腹腔注射环孢素A 30 mg·(kg·d)-1,B组移植后腹腔注射环孢素A 30 mg·(kg·d)-1,第7天球后静脉注射供体脾细胞,第10天环孢素A减量至15 mg·(kg·d)-1;C组移植后腹腔注射环孢素A 30 mg·(kg·d)-1,第7天球后静脉注射生理盐水,第10天环孢素A减量至15 mg·(kg·d)-1;D组只进行同种异体皮片移植。大体观察移植皮片存活情况并绘制生存曲线,术后第11天取各组小鼠移植皮片行病理切片染色以评估免疫排斥病理分级,荧光定量PCR检测术后第1、4、7、8、10天小鼠脾脏白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)m RNA变化及第11天脾脏IL-10、转化生长因子β(transforming growth factor,TGF-β)m RNA水平,第8、10、15天行流式检测各组小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)比例变化。【结果】B组的移植皮片平均存活时间较C组延长3.18天,差异具有统计学意义(P<0.01)。对照皮肤排斥病理分级,第11天病理HE染色示A、B组病理分级为0级,而C、D组为3级。B组小鼠脾脏调节性T细胞比例在第8天到第10天有明显升高的变化,其余各组无明显变化。对比第10天脾脏调节性T细胞比例,B组较C组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。B组小鼠脾脏IL-2 m RNA在第7到8天有明显的升高,其余各组无明显变化。对比第11天脾脏IL-10、TGF-βm RNA的比值,B组较C组高,差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】急性排斥期静脉注射供体脾脏细胞,能增加脾脏调节性T细胞数量,提高抑制性细胞因子IL-10、TGF-βm RNA水平,从而显著延长同种异体皮片移植物存活时间。