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人脐静脉内皮细胞的分离培养和鉴定及酪氨酸激酶受体-2在其中的表达
引用本文:吴世卿,郑俊发,曾曙光,陈少鹏,薛国初,章锦才. 人脐静脉内皮细胞的分离培养和鉴定及酪氨酸激酶受体-2在其中的表达[J]. 华西口腔医学杂志, 2009, 27(6): 653-656. DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2009.06.019
作者姓名:吴世卿  郑俊发  曾曙光  陈少鹏  薛国初  章锦才
作者单位:南方医科大学附属口腔医院·广东省口腔医院,口腔颌面外科,广东,广州,510280;中国科学院,广州生物医药与健康研究所,广东,广州,510663
基金项目:广东省科技计划基金资助项目,广东省科研基金资助项目 
摘    要:目的分离和培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),对其进行鉴定,并探讨酪氨酸激酶受体-2(Tie-2)基因在HUVECs中的表达情况。方法用胰蛋白酶消化、分离HUVECs并对其进行培养,根据细胞生长特点、形态特征和Ⅷ因子免疫荧光组化技术对细胞进行鉴定。分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和SABC免疫细胞化学染色对HUVECs中Tie-2 mRNA和蛋白表达情况进行检测。结果原代培养的HUVECs约于24 h完全贴壁,4~5 d后融合成单层铺路石样结构。Ⅷ因子免疫荧光组化法证实细胞是HUVECs。RT-PCR检测到HUVECs中Tie-2 mRNA条带明显,SABC免疫细胞组化法检测到Tie-2蛋白在HUVECs胞浆、核膜中呈强阳性表达,阳性率为85%以上。结论胰蛋白酶灌流消化法可获得高纯度的HUVECs,Tie-2在HUVECs中呈强阳性表达。

关 键 词:人脐静脉内皮细胞  酪氨酸激酶受体-2  肿瘤
收稿时间:2009-12-25
修稿时间:2009-12-25

Culture and identify the human umbilical vein endothelial cells and investigate the expression of tyrosine kinase-2 with immunoglobulin-like and epidermal growth factor homology domains in the cells
WU Shi-qing,ZHENG Jun-fa,ZENG Shu-guang,CHEN Shao-peng,XUE Guo-chu,ZHANG Jin-cai. Culture and identify the human umbilical vein endothelial cells and investigate the expression of tyrosine kinase-2 with immunoglobulin-like and epidermal growth factor homology domains in the cells[J]. West China journal of stomatology, 2009, 27(6): 653-656. DOI: 10.3969/j.issn.1000-1182.2009.06.019
Authors:WU Shi-qing  ZHENG Jun-fa  ZENG Shu-guang  CHEN Shao-peng  XUE Guo-chu  ZHANG Jin-cai
Affiliation:1. Dept. of Oral and Maxillofacial Surgery, Guangdong Provincial Stomatology Hospital, The Affiliated Stomatology Hospital of Southern Medical University, Guangzhou 510280, China; 2. Guangzhou Institute of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510663, China
Abstract:
Keywords:human umbilical vein endothelial cells  tyrosine kinase-2 with immunoglobulin-like and epidermal growth factor homology domains  tumor
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