| 真核表达载体pIRES2-EGFP-PDLIM2的构建及在EJ细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 肖峻,陈俊星,陈凌武,吴荣佩,黄斌,林焕懿,邓楠,雒向宁.真核表达载体pIRES2-EGFP-PDLIM2的构建及在EJ细胞中的表达[J].中国临床康复,2011(7):1205-1209. |
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| 作者姓名： | 肖峻 陈俊星 陈凌武 吴荣佩 黄斌 林焕懿 邓楠 雒向宁 |
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| 作者单位： | 中山大学附属第一医院泌尿外科,广东省广州市510080 |
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| 摘 要： | 背景：核因子κB在肿瘤生成过程中起重要作用,PDLIM2基因可以介导终止核因子κB的活性,解除核因子κB对肿瘤细胞的凋亡抑制作用。目的：克隆人PDLIM2全长基因,构建pIRES2-EGFP-PDLIM2真核表达载体。方法：采用反转录-聚合酶链反应从新鲜膀胱组织总RNA中克隆PDLIM2全长基因,与经BamHI、XhoⅠ相同双酶切的pIRES2-EGFP质粒载体连接,构建重组质粒pIRES2-EGFP-PDLIM2,经酶切及测序鉴定重组质粒中PDLIM2基因的完整性和忠实性。荧光显微镜下观察重组质粒转染的EJ细胞GFP报告基因表达强度,并对转染细胞PDLIM2的表达进行RT-PCR检测。结果与结论：经酶切和测序证实重组质粒构建正确,并在转染的EJ细胞中获得PDLIM2的高效表达。表明用反转录-聚合酶链反应方法成功从膀胱组织中克隆出PDLIM2全长基因,成功构建pIRES2-EGFP-PDLIM2真核表达载体。
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| 关 键 词： | 载体 PDLIM2 真核表达 基因克隆 EJ细胞 |
Construction of pIRES2-EGFP-PDLIM2 eukaryotic expression vector and its expression in EJ cells |
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| Xiao Jun,Chen Jun-xing,Chen Ling-wu,Wu Rong-pei,Huang Bin,Lin Huan-yi,Deng Nan,Luo Xiang-ning.Construction of pIRES2-EGFP-PDLIM2 eukaryotic expression vector and its expression in EJ cells[J].Chinese Journal of Clinical Rehabilitation,2011(7):1205-1209. |
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| Authors: | Xiao Jun Chen Jun-xing Chen Ling-wu Wu Rong-pei Huang Bin Lin Huan-yi Deng Nan Luo Xiang-ning |
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| Institution: | Department of Urology,First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,Guangdong Province,China |
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