Brg1调控重组人骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化术

背景：Brgl是依赖ATP的染色质改变复合物的核心催化弧基，该亚基在基因的转录调控、复制、重组，骨骼肌的分化、抑制肿瘤的发生等活动中起着重要的作用。目的：探索Brgl基因在骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化过程中的调控机制。方法：采用胶原酶消化法进行小鼠颅骨成骨细胞的原代培养；分别用0，50，200pg／L的重组人骨形态发生蛋白2诱导原代培养的成骨细胞的分化，摸索骨形态发生蛋白2的最佳作用剂量：实时荧光定量PCR和Westernblot进行骨形态发生蛋白2对Brgl的作用时间的动力学分析：实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测敲除Brgl对骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化的影响；构建DIx5腺病毒重组表达载体，实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测Brgl在骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化过程中对Dlx5的调控作用。结果与结论：用自行合成的重组人骨形态发生蛋白2可诱导原代培养小鼠成骨细胞分化，200pg／L剂量有着较好的诱导分化效果；重组人骨形态发生蛋白2可诱导Brgl基因转录水平和翻译水平表达水平上调；敲除Brgl可抑制熏组人骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化：Brgl能够调控DIx5的表达水平。说明Brgl通过调控DIx5的表达水平调控重组入骨形态发生蛋白2诱导的小鼠成骨细胞的分化。

Brgl regulates bone morphogenetic protein-2 induced osteogenic differentiation