CDH17调节TGF-β自分泌影响胃癌细胞侵袭作用的研究

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β自分泌在钙黏蛋白17(CDH17)调节胃癌细胞侵袭性中 的作用及可能机制.方法 构建siRNA-CDH17并转染入胃癌细胞系MKN-45,沉默其表达.通过免疫荧光染色、 Western blot、ELISA检测CDH17沉默前后细胞TGF-β表达及培养上清液中TGF-β水平变化,观察TGF-β的自分 泌情况.同时采用Western blot检测TGF-β/Smad3信号通路活化情况,并通过Transwell侵袭实验观察在给予 信号通路抑制剂后,胃癌细胞侵袭力的变化,评价TGF-β自分泌及相关信号通路活化在CDH17调节胃癌细胞侵袭 性中的作用.结果 转染siRNA-CDH17沉默MKN-45细胞CDH17表达后,细胞TGF-β表达较未转染组明显下降,其培 养上清液中TGF-β水平也显著减少(510±55.0)pg/mL vs.(115±20)pg/mL,P<0.05].Western blot显示 CDH17沉默后Smad3磷酸化水平也明显降低,而给予TGF-β/Smad3信号通路抑制剂SIS3(10 μmol/L)也可抑制 CDH17高表达时的Smad3磷酸化水平.同时,沉默CDH17及抑制Smad3磷酸化均可明显降低MKN-45细胞侵袭性 (P<0.05).结论 CDH17可能通过促进自分泌TGF-β活化TGF-β/Smad3信号通路参与调节胃癌细胞侵袭性.