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雌激素及雌激素受体拮抗剂ⅡCI 182780对大鼠垂体泌乳素GH3细胞Calbindin-D9k表达的影响
作者姓名:王婉,  武云龙,  刘晶,  梁前垒,  赵原正,  郭永川
作者单位:[1]吉林大学基础医学院免疫学系,长春130021; [2]吉林大学中日联谊医院神经外科,130033
基金项目:吉林省自然科学基金面上项目(201115096)
摘    要:目的 探讨17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对大鼠泌乳素腺瘤细胞株GH3细胞Calbindin-D9k(CaBP-9k)表达的影响,并探讨选择性雌激素受体拮抗剂ⅡCI 182780是否能够拮抗雌激素对CaBP-9k表达的诱导作用.方法 以GH3细胞作为垂体泌乳素腺瘤的体外模型,通过免疫荧光法观察CaBP-9k在GH3细胞的表达情况;E2分3个剂量:10-8、10-9、10-10 M对GH3细胞作用24h,分别以RT-PCR法及Western blot法检测CaBP-9k基因和蛋白的表达水平;E2以10-8 M的剂量对GH3细胞作用24 h,同时设ⅡCI 182780拮抗组(10-6M),被用于研究ER介导的通路对CaBP-9k表达的影响;用免疫共沉淀法检测CaBP-9k与ERα的相互作用关系.结果 在GH3细胞中,CaBP-9k的表达水平随E2给药浓度的增高而增加.当同时给予ⅡCI 182780时,E2诱导CaBP-9k表达的作用被拮抗,其表达水平显著降低.进一步通过免疫共沉淀法证实,在GH3细胞中,CaBP-9k与ERα能够直接结合,E2能够上调2者的相互作用.结论 雌激素可能通过ERα途径诱导GH3细胞CaBP-9k的表达,且CaBP-9k与ERα能够直接结合相互作用.提示CaBP-9k可能参与GH3细胞ER途径相关的生物学效应.

关 键 词:GH3细胞  雌激素  雌激素受体  ⅡCI  182780  Galbindin-D9k
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