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RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响
引用本文:杨清玲,丁勇兴,王惠,李成华. RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响[J]. 中国药理学通报, 2008, 24(6): 792-796
作者姓名:杨清玲  丁勇兴  王惠  李成华
作者单位:1. 蚌埠医学院生化与分子生物学教研室,安徽,蚌埠,233000
2. 蚌埠市中心医院肿瘤科,安徽,蚌埠,233000
3. 蚌埠医学院临床检验诊断实验中心,安徽,蚌埠,233000
基金项目:安徽省自然科学基金 , 安徽省临床医学应用技术研究计划项目 , 蚌埠市科技计划项目
摘    要:目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。(1)半定量RT-PCR、Western blot法检测survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析多西他赛对各组细胞存活率作用的浓度。结果(1)RT-PCR检测结果显示,RNAi组survivin扩增条带(134bp)明显弱于空载体组及对照组,mRNA相对含量较空载体组明显下降(75.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测空载体组与对照组survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失(79.8%);(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,与空载体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度多西他赛处理后对照组、空载体组、RNAi组的IC50分别为(124.7±0.21)、(116.9±0.25)、(15.2±2.8)μg.L-1,RNAi组MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性增高(P=0.000)。结论RNAi明显抑制了survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制survivin基因表达,能明显提高乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性。

关 键 词:乳腺癌  survivin  多西他赛  RNA干扰
文章编号:1001-1978(2008)06-0792-05
修稿时间:2008-02-28

Study of the RNA interference silencing of survivin gene and chemosensitivity to docetaxel in MCF-7 cells
YANG Qing-ling,DING Yong-xing,WANG Hui,LI Cheng-hua. Study of the RNA interference silencing of survivin gene and chemosensitivity to docetaxel in MCF-7 cells[J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2008, 24(6): 792-796
Authors:YANG Qing-ling  DING Yong-xing  WANG Hui  LI Cheng-hua
Abstract:
Keywords:breast cancer  survivin  docetaxel  RNAi
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