两段法培养适合临床移植应用的黑素细胞的安全性研究

目的：探讨使用两段法培养黑素细胞，以消除佛波醇酯(TPA)的致瘤危险，增加培养细胞的安全性，从而适合临床移植的需要。方法：两段法培养黑素细胞：先用含TPA培养液培养纯化黑素细胞，然后用不含TPA的培养基继续扩增传代。通过细胞形态、生长特性、细胞周期等检测观察有无TPA时培养细胞的特性。接种裸鼠检测培养细胞的致瘤性。结果：用含TPA培养液容易获得纯化的黑素细胞；扩增传代时改用不含TPA的培养基，黑素细胞由细长的多分支逐渐变成两极的宽梭形。生长速度略微减慢，细胞周期显示增殖减缓。裸鼠致瘤实验阴性。结论：两段法培养黑细胞成功率高，和以往培养基中含TPA的培养方法相比，所培养黑素细胞形状变化明显，生长减慢，用于临床移植时更加安全。