| 双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定 |
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| 引用本文： | 钟怡,董珂,杨杨,冯春燕,郭晓奎.双曲钩端螺旋体溶血素基因tlyA的克隆、表达及初步功能鉴定[J].中国人兽共患病杂志,2007,23(8):739-744. |
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| 作者姓名： | 钟怡 董珂 杨杨 冯春燕 郭晓奎 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院病原生物学教研室，上海交通大学医学院病原生物学教研室，上海交通大学医学院病原生物学教研室，上海交通大学医学院病原生物学教研室，Laboratory of the Spirochetes Pasteur institute，上海交通大学医学院病原生物学教研室，上海200025，上海200025，上海200025，上海200025，28 street of Doctor Roux，75724，Paris Cedex 15，France，上海200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;上海市重点学科建设项目 |
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| 摘 要： | 目的研究双曲钩端螺旋体(简称双曲钩体)是否含有溶血素基因,并鉴定其溶血活性。方法对双曲钩体LEBIa2503基因编码产物进行结构域预测、序列比对后,PCR扩增目的片断,克隆到原核表达载体pET28b( ),转化宿主细胞,并诱导表达产物进行初步功能鉴定。同时,以RT-PCR检测LEBIa2503的转录情况。另外,也对双曲钩体菌体本身有无溶血活性进行检测。结果双曲钩体LEBIa2503基因与问号钩体tlyA溶血素基因在蛋白水平上有相同的结构域,属于直系同源基因(orthologues gene)。原核表达的重组融合蛋白在羊血平板上出现β-溶血环。以RT-PCR的方法能检测到在双曲钩体中有LEBIa2503基因的转录,但双曲钩体菌体本身则检测不到溶血活性。结论未发现双曲钩体有溶血活性,但其含有溶血素基因tlyA,并且在普通培养环境下能被转录,这对进一步研究其内在机制奠定了基础,并对探索致病性问号钩体致病机制提供了一定线索。
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| 关 键 词： | 双曲钩端螺旋体 溶血素 tlyA基因 原核表达 |
| 文章编号： | 1002-2694（2007）08-0739-06 |
| 修稿时间： | 2007-01-222007-03-09 |
Cloning, expression and preliminary characterization of a hemolysin gene tlyA from Leptospira biflexa serovar Patoc |
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| Picardeau M,ZHONG Yi,DONG Ke,YANG Yang,FENG Chun-yan,Picardeau M,GUO Xiao-kui.Cloning, expression and preliminary characterization of a hemolysin gene tlyA from Leptospira biflexa serovar Patoc[J].Chinese Journal of Zoonoses,2007,23(8):739-744. |
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| Authors: | Picardeau M ZHONG Yi DONG Ke YANG Yang FENG Chun-yan Picardeau M GUO Xiao-kui |
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| Institution: | Department of Microbiology and Parasitology, Shanghai J iao Tong University School of Medicine, Shanghai 200025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Leptospira biflexa hemolysin tly gene prokaryotic expression |
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