缝隙连接蛋白43在长波紫外线诱发人皮肤光老化中的作用

目的 探讨缝隙连接蛋白43（connexin 43，Cx43）在长波紫外线（ultraviolet A，UVA）诱发人皮肤光老化中的作用。方法（1）体外培养原代人皮肤成纤维细胞（human dermal fibroblasts，HDFs），分为对照组、UVA照射组，采用CCK-8实验筛选出安全条件后，使用5 J/cm2 UVA照射实验组细胞1 h；在照射后0 h、6 h、12 h、24 h分别收集细胞及培养上清液，采用ELISA法检测细胞上清中基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinases-1，MMP-1）和MMP-9的水平；采用qRT-PCR法和Western blot法检测细胞内Cx43 mRNA和蛋白的表达水平。（2）瞬时转染Cx43-siRNA，采用ELISA法检测细胞上清中MMP-1和MMP-9的水平。（3）将HDFs分为对照组、UVA组、UVA+TNF受体1中和抗体组，经UVA照射后，采用qRT-PCR和ELISA法检测细胞中Cx43 mRNA表达和上清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和MMP-1水平。结果（1）与对照组相比，UVA组MMP-1和MMP-9水平呈时间依赖性上升（P<0.001），同时Cx43 mRNA和蛋白表达水平均明显下降（P<0.01）；（2）Cx43-siRNA显著下调Cx43表达后，MMP-1和MMP-9水平显著上升（P<0.001）；（3）与对照组相比，UVA组TNF-α和MMP-1水平显著上升（P<0.01），同时UVA+TNF受体1中和抗体组Cx43和MMP-1水平无明显升高。结论 Cx43可能参与介导了UVA通过诱导TNF-α信号通路引发的皮肤光老化过程，这种介导作用可能是通过Cx43对皮肤中MMP-1的调控得以实现。

Role of connexin 43 in photoaging of human skin induced by ultraviolet A