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人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化
引用本文:劳兴珍,吴国球,沈子龙.人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化[J].中国新药杂志,2004,13(6):515-517.
作者姓名:劳兴珍  吴国球  沈子龙
作者单位:1. 中国药科大学生物技术中心,南京,210009
2. 东南大学附属中大医院检验科,南京,210009
摘    要:目的:研究人cTnI基因在大肠杆菌中的融合表达和纯化.方法:以pCOMb3-cTnI为模板,用PCR方法得到了编码该蛋白的基因,进一步将该基因克隆到中间载体pUCm-T,再酶切得到cTnI基因插入到pKL载体中,构建成表达质粒pKL-cTnI.在BL21细胞中经IPTG诱导表达,利用载体携带6×His纯化标签,以HisTrap Kit纯化重组蛋白,并进行免疫活性测定.结果:融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,并用HisTrapKit成功纯化目的蛋白.ELISA分析证实该重组蛋白具有与天然心肌肌钙蛋白相似的免疫活性.结论:本研究为建立急性心肌梗死早期诊断试剂奠定了基础.

关 键 词:人心肌肌钙蛋白I  原核表达  融合蛋白  亲和层析  急性心肌梗死
文章编号:1003-3734(2004)06-0515-03
修稿时间:2003年12月27

Expression and purification of human cardiac troponin I(cTnI) fusion protein in E.coli
LAO Xing-zhen,WU Guo-qiu,SHEN Zi-long.Expression and purification of human cardiac troponin I(cTnI) fusion protein in E.coli[J].Chinese Journal of New Drugs,2004,13(6):515-517.
Authors:LAO Xing-zhen  WU Guo-qiu  SHEN Zi-long
Abstract:
Keywords:
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