M1-GS RNA靶向作用于K562细胞的研究

目的；探讨带有导引序列的核糖核酸酶P亚单位M1 RNA(M1-GS RNA)转染白血病细胞株K562细胞后对bcr-abl融合基因mRNA及其表达产物的作用效应。方法：含有针对bcr-abl mRNA的M1-GS RNA表达质粒pAVGS4，以X-treme Q2介导转染K562细胞，设置空载体组作为对照，分别在转染后24，48，72和96h收集细胞，以Trizol试剂抽提总RNA，通过RT-PCR检测转染后不同时间bcr-abl mRNA的变化；在转染后48和96h，抽提总蛋白质，通过Western blot检测癌基因的表达产物P210在不同时间的变化。利用半固体琼脂培养方法观察pAVGS4对K562细胞集落形成的影响。结果：pAVGS4转染K562细胞后24，48，72和96h RT-PCR结果显示：在转染后24h，随时间的推移，实验组细胞内bcr-ablmRNA含量下降近1个对数级，72和96h实验组细胞内bcr-abl mRNA的含量接近，而对照组无明显改变。Western blot结果显示：实验组在48h的灰度值是同期对照组的10．4％，96h时为6．7％。K562细胞集落形成分析显示96h后集落抑制率达81．3％。结论：M1-GS RNA可以有效、特异地破坏bcr-abl mRNA，显著下调P210的表达，抑制K562集落形成。

Study on the targeting effects of M1-GS RNA on K562 cells