含pcHEV乃壳聚糖纳米粒的制备及对小鼠免疫作用的影响

目的将壳聚糖包载含戊型肝炎主要抗原表位基因片段的重组质粒pcHEV23，制备成CS-pcHEV23纳米粒，并对其在小鼠体内的免疫增强效果进行初步研究。方法采用复凝聚法制备CS-pcHEV23纳米粒；检测纳米粒的粒径、包封率及抵抗核酸酶能力；分析壳聚糖与pcHEV23的聚合情况；免疫小鼠，ELISA法检测血清中HEVIgC抗体水平，流式细胞仪检测外周血CD4^＋．CD8^＋T淋巴细胞亚群百分比含量和CD4^＋/CD8＋。结果制备CS-pcHEV霉纳米粒粒径在170-470nm范围内；包封率〉95％；pcHEV。通过静电作用几乎完全被包裹在壳聚糖内；纳米粒能抵抗DNaseI酶降解有效保护pcHEV23。免疫实验表明CS--pcHEV23纳米粒可上词小鼠血清HEVIgG抗体水平，并显著提高外周血CD4^＋T淋巴细胞百分含量和CD4^＋／CD8^＋值。结论壳聚糖能高效装载外源基因pcHEV23，保护其免受核酸酶的降解，有效提高小鼠细胞免疫水平，具有良好的免疫增强作用，作为基因载体具有较大的应用潜力。