| VEGF165在哺乳动物细胞中的稳定表达 |
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| 引用本文： | 唐浩,陈勇,夏昆,文娟,卿志荣,赵天力,杨进福,胡冬煦. VEGF165在哺乳动物细胞中的稳定表达[J]. 中国医师杂志, 2004, 6(7): 868-871 |
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| 作者姓名： | 唐浩 陈勇 夏昆 文娟 卿志荣 赵天力 杨进福 胡冬煦 |
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| 作者单位： | 1. 中南大学湘雅二医院胸心外科,湖南,长沙,410011
2. 医学遗传学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 医学遗传学国家重点实验室开放课题资助项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨pcDNA3．1-VEGF165质粒对哺乳动物细胞的表达和转染。方法将pcDNA3．1-VEGF165质粒用电转的方法导入CHO细胞中，C418筛选细胞克隆。通过RT—PCR、ELISA、Westen—blot在转录水平和蛋白质水平上检测VEGF165在转基因CHO细胞中的表达。通过内皮细胞增殖实验和血管通透性实验检测所表达的VEGF165的生物学活性。结果获得有C418抗性的CHO细胞克隆。RT—PCR扩增出一条大小约600bp的特异性泳带，测序结果与VEGF165mRNA一致。ELISA显示细胞培养上清的VEGF浓度约为10-20ng／ml。WESTEN—BLOT检测到大小为23KD的特异性蛋白质条带。内皮细胞增殖实验显示细胞培养上清具有促内皮细胞增殖作用。血管通透性实验显示细胞培养上清明显增加毛细血管通透性。结论pcDNA3．1-VEGF165质粒真核表达系统能在哺乳动物细胞中表达具有良好生物学活性的VEGF165蛋白。
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| 关 键 词： | VEGF165 哺乳动物细胞 基因表达 转基因 CHO细胞 心肌缺血 |
| 修稿时间： | 2004-03-29 |
The stable Expression of VEGF165 in Mammalian Cells |
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| TAN Hao,CHEN Yong,XIA Kun,et al.. The stable Expression of VEGF165 in Mammalian Cells[J]. Journal of Chinese Physician, 2004, 6(7): 868-871 |
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| Authors: | TAN Hao CHEN Yong XIA Kun et al. |
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| Affiliation: | TAN Hao,CHEN Yong,XIA Kun,et al. Department of Cardiothoracic Surgery,The Second Xiangya Hospital,Central South University,Changsha 410011,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VEGF CHO cell Gene transfection Gene expression |
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